[发明专利]一种基于ITGB5基因的胶质母细胞瘤辅助诊断、预后评价试剂盒及其使用方法

权利要求书

1.一种ITGB5基因在制备胶质母细胞瘤辅助诊断、预后评价试剂盒中的应用，其特征在于，包括扩增ITGB5基因的PCR引物对，所述引物对为：

正向引物序列为5’-GGAAGTTCGGAAACAGAGGGT-3’

反向引物序列为5’-CTTTCGCCAGCCAATCTTCTC-3’。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述试剂盒还包括扩增管家基因GAPDH的PCR引物对，所述引物对为：

正向引物序列为5’-GGAGCGAGATCCCTCCAAAAT-3’

反向引物序列为5’-GGCTGTTGTCATACTTCTCATGG-3’。

3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述试剂盒包括SYBR Green聚合酶链式反应体系，所述SYBR Green聚合酶链式反应体系包括PCR缓冲液、dNTPs、SYBR Green荧光染料、无酶水和荧光定量加样板。

4.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述试剂盒包括RNA提取试剂，所述RNA提取试剂包含Trizol、氯仿、异丙醇、75％乙醇和RNase free 水。

5.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述试剂盒包括将mRNA反转录为cDNA的体系，该反转录试剂5 X RT master mix 为PrimeScript RTase、RNase Inhibitor、Random 6mers、Oligo dT Primer 、dNTP Mixture、反应 Buffer，荧光定量PCR反应体系SYBR PremixEx TaqTM。

6.如权利要求1所述的应用，其特征在于，试剂盒的使用方法具体包括以下步骤：

(1)将获取的新鲜组织经过液氮处理研磨后进行RNA抽提；

(2)将抽提出的RNA反转录成对应的cDNA；

(3)将反转录后的cDNA进行对ITGB5和GAPDH基因的荧光定量PCR扩增；

(4)以GAPDH作为内参，记录每个反应的Ct值，检测结果以-ΔCt表示，其中ΔCt＝CtGene-CtGAPDH。