[发明专利]用于诊断结直肠息肉的血浆miRNA分子标志物、试剂盒及其应用

说明书

本发明公开了一种用于诊断结直肠息肉的血浆miRNA分子标志物，所述miRNA为miR‑451a、miR‑223‑3p、miR‑21‑5p和miR‑16‑5p中的一种或多种。本发明首次发现SEQ ID NO.1～4所示的miRNA分子标志物能够用于诊断结直肠息肉，获得的诊断模型具有较高的诊断效率，尤其是合并4条miRNA的诊断模型，其AUC(95％CI)为0.838(0.806,0.870)。使用本发明提供的miRNA分子标志物诊断结直肠息肉，不仅操作简单、安全无创伤，而且具有高灵敏度、高特异性以及易于大量筛查的特点。

技术领域

本发明涉及临床检验诊断技术领域，尤其涉及一种用于诊断结直肠息肉的血浆miRNA分子标志物、试剂盒及其应用。

背景技术

结直肠息肉指结直肠粘膜面突向肠腔的隆起，可分为腺瘤性息肉和非腺瘤性息肉，是一种非常常见的疾病。患者常无任何临床症状，多数在进行其他检查时偶然发现，部分患者可表现为便血、腹泻、腹痛、粘液便或脓血便。许多研究表明，结直肠息肉是结直肠癌的癌前病变，摘除息肉能有效降低结直肠癌的发病率。因此，结直肠息肉的早发现、早诊断、早治疗具有重要的意义。

目前，用于结直肠息肉的诊断方法主要有粪便隐血试验、直肠指诊、气钡双重造影和结肠镜检查。粪便隐血试验简单经济，但该法假阴性率高，可作为人群筛查的基本手段。气钡双重造影是诊断低位胃肠疾病的主要方法，阳性率较低，且直径小于1.0cm的息肉不容易被发现。结肠镜检查是发现结直肠息肉最重要的方法，但这是一种侵入性的检查方法，患者需承受一定的痛苦，可能出现一定的并发症，且价格昂贵，无法大规模推广。随着分子生物学的发展，结直肠息肉分子标志物的研究越来越深入。

miRNA是一类内生的、长度约为20-24个核苷酸的小分子RNA，广泛存在于真核细胞，不具备编码功能，通过翻译抑制调控基因的表达，具有高度保守性、时序性和组织特异性。miRNA参与细胞分化、生物发育以及疾病的发生发展过程，在很多疾病的诊断和治疗中发挥了重大作用。结直肠息肉miRNA标志物的研究能辅助诊断结直肠息肉，且此方法更加简单经济、安全无创。

目前，关于结直肠癌相关的miRNA标志物的研究已有大量报道，例如：

申请公告号为CN106367477A和CN107746886A的发明专利申请文献公开了一种与结直肠癌辅助诊断相关的血清miRNA标志物及其应用，标志物为miR-19a-3p、miR-21和miR-425-5p中的一种或多种；以及miR-103a-3p、miR-127-3p、miR-151a-5p、miR-17-5p、miR-181a-5p、miR-18a-5p和miR-18b-5p中的一种或多种。

申请公告号为CN105624271A的发明专利申请文献公开了一种与结直肠癌相关的miRNA及其应用，该标志物为miR-1290。

申请公告号为CN108088999A的发明专利申请文献公开了一种与结直肠癌相关的miRNA标志物及其应用，所述标志物为miR-16、miR-21和miR-92a的组合。

申请公告号为CN108004323A的发明专利申请文献公开了组织中与结直肠癌转移相关的miRNA标志物及其应用，标志物为miR-96、miR-99b、miR-155、let-7a和let-7b中的任意一种或几种。

然而，以上研究均是针对于诊断结直肠癌的分子标志物的研究，对于结直肠息肉的诊断标志物却少有研究；而且，结直肠息肉为结直肠癌的癌前病变，诊断难度大于结直肠癌，结直肠癌适用的miRNA标志物不一定适用于结直肠息肉。结直肠癌的发生发展是一个多阶段的漫长过程，研究发现，近95％的结直肠癌是由息肉演变而来，经历正常黏膜→增生→腺瘤形成→腺瘤癌变的过程，一般需要5～10年的时间。这就为结直肠癌的预防提供了极有利的机会，如果能够在息肉腺瘤阶段就斩草除根，就能有效防止结直肠癌的发生。