[发明专利]一种雄黄微生物浸出作为PML-RARα蛋白抑制剂的应用

说明书

一种雄黄微生物浸出液在制备治疗急性早幼粒细胞白血病药物中的应用。本发明所提供的雄黄微生物浸出液可以显著降低急性早幼粒细胞白血病细胞中癌蛋白PML‑RARα蛋白的含量，从而在制备抑制急性早幼粒细胞白血病细胞的增殖，并促使癌细胞向正常早幼粒细胞分化药物中应用。

技术领域

本发明属于生物医药领域，涉及一种雄黄微生物浸出液(RTS)的新用途，具体涉及一种雄黄微生物浸出液的在制备降解癌蛋白PML-RARα药物中的应用。

背景技术

90％以上的急性早幼粒细胞白血病(APL)患者存在一种特异的t(15；17) 染色体易位，该易位是由于位于17号染色体上的维甲酸受体α(RARα)基因与 15号染色体上的早幼粒细胞(PML)基因发生交互易位，从而形成PML-RARα癌蛋白引起的^[1]，PML-RARα癌蛋白不但能够促进APL的发展，还能阻滞分化基因的转录，从而导致APL停留在早幼粒阶段^[2,3]。因此，癌蛋白PML-RARα已成为治疗急性早幼粒细胞白血病的靶标。

雄黄经过微生物浸出后，活性成分较雄黄原药相比发生了很大变化，雄黄微生物浸出液中不仅存在三价砷和五价砷，还存在有机砷。本发明中发现了作为 PML-RARα蛋白抑制剂的应用，雄黄微生物浸出液不仅在对PML-RARα蛋白的抑制活性方面优于三氧化二砷制剂和雄黄，且毒性更低。本发明实验结果显示雄黄微生物浸出液能够显著抑制急性早幼粒细胞白血病细胞的增殖，并诱导急性早幼粒细胞白血病细胞的分化，达到减缓急性早幼粒细胞白血病进程的目的，可作为PML-RARα蛋白抑制剂，也可用于制备抑制急性早幼粒细胞白血病细胞的增殖的药物，促使癌细胞向正常早幼粒细胞分化。

参考文献

1.董硕,陈竺,and王振义,急性早幼粒细胞白血病的分子生物学研究进展. 国际输血及血液学杂志,1992(3):p.147-149.

2.Chen,S.-J.,et al.,From an old remedy to a magic bullet:molecularmechanisms underlying the therapeutic effects of arsenic in fightingleukemia. Blood,2011.117(24):p.6425-6437.

3.Vitaliano-Prunier,A.,et al.,Clearance of PML/RARA-bound promoterssuffice to initiate APL differentiation.Blood,2014.124(25):p.3772-80.

发明内容：

本发明公开了一种雄黄微生物浸出液作为PML-RARα蛋白抑制剂的应用。

本发明还公开了一种雄黄微生物浸出液在制备抑制急性早幼粒细胞增殖的药物中的应用。

本发明还公开了一种雄黄微生物浸出液在制备促使癌细胞向正常早幼粒细胞分化的药物中的应用。

本发明还公开了一种雄黄微生物浸出液在制备治疗急性早幼粒细胞白血病药物中的应用。

本发明所述雄黄微生物浸出液的制备方法，具体方法如下：称取雄黄，过筛，灭菌，加入锥形瓶中，加入灭菌后的9K无铁液体培养基，用硫酸调pH至 1.75，待pH稳定后，接种体积分数为20％氧化亚铁硫杆菌，添加FeSO₄使培养基的Fe²⁺的终浓度达到1.0g/L，称取质量后，在30℃、振荡速度为135rpm时摇瓶浸出30天，实验过程中采用体积比为1：1的硫酸水溶液调节pH值，用蒸馏水补充所蒸发的水分，摇瓶浸出30天后停止，减压抽滤收集上清液，调节浸出液pH至7左右，过0.22微米滤膜除菌后即得雄黄微生物浸出液。