[发明专利]一种O型口蹄疫病毒抗体的可视化快速检测试剂盒及其应用

说明书

本发明公开了一种O型口蹄疫病毒抗体的可视化快速检测试剂盒及其应用，涉及生物检测技术领域。所述试剂盒包括：O型口蹄疫病毒抗原、包被酶标板、洗涤液、血清和抗体稀释液、底物显色液TMB、辣根过氧化物酶标二抗、终止液、O型口蹄疫病毒标准阴阳性血清；其中，所述酶标板以O型口蹄疫病毒146s包被。可以通过颜色变化来判定结果，溶液是蓝色为阳性，无色为阴性，本发明的用于检测O型口蹄疫病毒的抗体，具有高敏感性、特异性和重复性均良好的优点，且该试剂盒在室温下操作，适用于基层临床可视化检测。

技术领域

本发明属于生物检测技术领域，本发明公开了一种O型口蹄疫病毒抗体的可视化快速检测试剂盒及其应用。

背景技术

口蹄疫是一种由口蹄疫病毒(FMDV)所致的急性的、热性的、高度接触性传染病，主要侵害偶蹄兽，经常在羊、牛、猪等动物中传播。发病时易感动物的唇和蹄部出现水疱，同时伴有发烧、食欲不振等症状，患病动物体重和产奶量大幅下降。口蹄疫病毒易通过空气传播，传染性强，流行快速，易感动物在抵抗力较弱的情况下也会导致死亡，给养殖户造成巨大的经济损失，严重阻碍了养殖业的发展。

目前对于O型口蹄疫病毒抗体的诊断方法和疫苗免疫效果的评价方法只能在实验室完成，不适合基层检测，需要一种更为灵敏、快捷和简便的可视化的检测试剂盒。

发明内容

本发明的目的在于克服上述技术存在的缺陷，提供一种简便、快速及准确检测O型口蹄疫病毒抗体的试剂盒。

本发明第二个目的在于提供上述试剂盒的应用。

其具体技术方案为：

一种O型口蹄疫病毒抗体的可视化快速检测试剂盒，所述试剂盒包括：包被酶标板、洗涤液、血清稀释液、底物显色液、酶标二抗、终止液、标准阳性和阴性血清；其中，所述包被酶标板是以O型口蹄疫病毒146s作为包被抗原。

作为优选,所述洗涤液为含0.05％吐温-20的磷酸盐缓冲液，pH为7.2。

作为优选,所述血清稀释液为含50g/L脱脂奶粉的磷酸盐缓冲液；所述底物显色液为含有过氧化氢的四甲基联苯胺溶液。

作为优选,所述终止液为SDS或者硫酸溶液。

作为优选,所述包被抗原的包被浓度为2μg/mL；所述包被酶标板经50g/L脱脂奶粉PBST封闭，装入密封袋中置于4℃保存。

作为优选,所述酶标二抗的稀释倍数为1:20000。

本发明所述O型口蹄疫病毒抗体的可视化快速检测试剂盒在口蹄疫诊断试剂制备过程中的应用。

与现有技术相比，本发明的有益效果为：

本发明的间接ELISA试剂盒，使用O型口蹄疫病毒146s为包被抗原，其浓度易于确定和控制，有利于该试剂盒的大量生产与成本控制。

本发明的试剂盒用于检测O型口蹄疫病毒的抗体，具有高效、灵敏特异性和重复性均良好的优点，该试剂盒操作简便、快速、成本低廉，可以在室温下可视化检测，适合于在临床应用中进行推广，为O型口蹄疫病毒抗体的快速检测提供可靠的技术手段。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明的技术方案作进一步详细地说明。

本发明实施提供了上述0型口蹄疫病毒抗体的可视化快速检测方法及其应用，所述检测方法包括以下步骤：

用血清稀释液以体积比1：40的比例稀释待检血清得到稀释血清；

酶标板每孔中加入100μ所述稀释血清，酶标板各添加标准阳性和阴性血清作为对照，于室温孵育1h，弃去反应孔中液体，再向每孔加入洗涤液并洗涤3次，每次5分钟，弃洗涤液，最后一次拍干；