[发明专利]鲽鱼皮来源的活性二肽

说明书

本发明公开一种鲽鱼皮来源的活性二肽，其氨基酸序列为Ser‑Trp。该二肽具有明显的降血压活性，是一种由食品来源的、高安全性的、廉价的、具有可产业化的新型的ACE抑制剂，可以用于制备降血压药物或者保健食品。

技术领域

本发明涉及一种生物来源的具有血管紧张素I转换酶抑制活性的小分子肽。

背景技术

高血压是最常见的心血管疾病之一，它能造成大脑、心血管、肾脏的损害，是引起脑卒中、心力衰竭和冠心病等的重要因素，严重威胁着人类的健康。因此，治疗和预防高血压对提高人类的健康水准，延长寿命有着重要的意义。

血管紧张素I转换酶在人体肾素-血管紧张素系统和激肽释放酶-激肽系统中，对血压调节起着重要的作用。ACE可以将血管紧张素I转换为血管紧张素Ⅱ，使周围小动脉、血管平滑肌收缩，同时刺激醛固酮分泌，促进人体肾脏对Na⁺、K⁺的重吸收，引起钠储量和血容量的增加，使血压升高；还可以使舒缓激肽失活，引起血压升高。

综上所述，ACE一方面产生使血压上升的血管紧缩素II，另一方面，使具有血管舒张作用的舒缓激肽失活，这都造成了血压的上升。所以，如果抑制了ACE的活性，就可以起到降压的作用。

现有的作为治疗高血压的合成物卡普托利就是ACE的抑制剂，但它有很多副作用，所以源于食品蛋白中的ACE抑制肽因其无毒副作用，同时具有其它疗效而被广泛应用，市场前景极好。

发明内容

本发明的目的在于提供一种由食品来源的、高安全性的、廉价的、具有可产业化的新型的ACE抑制剂。

本发明通过对鲽鱼皮胶原蛋白酶解液的分离、纯化得到氨基酸序列为SW的小分子肽，具有ACE抑制活性，是有效的ACE抑制剂。

因此，本发明的首要，便在于提供一种鲽鱼皮来源的活性二肽，其氨基酸序列为Ser-Trp(SW)。该二肽具有明显的降血压活性。

本发明所述的活性二肽是从鲽鱼皮胶原蛋白中分离得到的，其制备方法包括如下步骤：

(1)预处理：鲽鱼皮去鳞去肉，洗净，剪碎成1cm×1cm的小块，4℃条件下，按料液比1g:10mL加入0.1mol/L的NaOH溶液，搅拌24h，每12h更换NaOH溶液；然后用4℃水冲洗鱼皮至中性，沥干；

(2)将经预处理的鲽鱼皮(以干重计)与20mmol/mL的磷酸盐缓冲溶液按料液比1g:32.5mL混合，煮沸20min后，采用中性蛋白酶酶解9h；灭活后，8000rpm离心20min，收集上清液，得酶解液；

(3)步骤(2)所制得的酶解液经超滤后，取分子量300-1000道尔顿的组分采用Sephadex LH-20进行分离，流动相为30％的甲醇溶液，柱温为室温，检测波长为280nm，按时间收集480-570min的产物，记为F6；

(4)步骤(3)所获得的产物F6经RP-HPLC Hypersil BDS C18进一步分离，上样体积20μl，上样浓度10mg/mL，流速1mL/min；

梯度洗脱：流动相A液：0.1％的TFA水溶液；流动相B液：乙腈；

0min：A，100％；B 0％；

40min：A，0％；B，100％；

50min：A，0％；B，100％；

检测波长为215nm；收集信号组分，监测并采集ACE抑制活性组分(第48-57管)。