[发明专利]一种辅助诊断宫颈癌及其癌前病变的miRNA组合标志物及其应用

说明书

本发明公开了一种辅助诊断宫颈癌及其癌前病变的miRNA组合标志物，所述的miRNA标志物为miR‑21、miR‑92a、miR‑218、miR‑29a、miR‑375、miR‑34a。本发明宫颈癌及其癌前病变辅助诊断试剂盒，检测样本为宫颈脱落细胞，非侵入，减少病人痛苦，填补宫颈癌标记物方面的空白，检测准确率不低于现有技术，操作简便、样本保存方便、不受取样位置和手法的影响。

技术领域

本发明属于基因工程及肿瘤学技术领域，具体涉及一种辅助诊断宫颈癌及其癌前病变的miRNA组合标志物及其应用。

背景技术

宫颈癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，占全球女性恶性肿瘤的第二位，仅次于乳腺癌。2011年，Lancet刊出的宫颈癌最新统计结果显示：从1980年到2010年，全球宫颈癌发病率平均以每年0.6％的增幅递增，仅2010年一年中，发展中国家因宫颈癌死亡的女性总数就达到200,000之多，死亡年龄也更趋于年轻化。宫颈癌的高发病率和年轻化趋势严重影响着中国广大妇女的健康和生活质量，因此对宫颈癌或其癌前病变的早期诊断和防治意义十分重大。

宫颈癌的发生是一个缓慢的过程，浸润性宫颈癌发生前通常有10-20年左右的癌前病变阶段，这一浸润前阶段在WHO的分类标准中被称作宫颈上皮内瘤样病变(cervicalintraepithelial neoplasia，CIN)。根据非典型细胞占宫颈上皮全层的厚度，可将CIN进一步分CIN可分为3期，即轻度上皮内瘤样病变(CIN I)，中度上皮内瘤样病变(CIN II)和重度上皮内瘤样病变(CIN III)，而原位癌归类于CIN III期。从CIN I期发展为浸润癌约需8-15年左右的时间，大部分CINI是短暂的，大约有60％左右的CINI还可逆转为正常，而中度和高度CIN进展为癌的可能性却很大，约有超过10％的CINIII会进展为浸润癌。但如果能很好地把握癌前病变这段时间，早期做出准确的诊断，及时采取相应的措施，就可以极大地提高宫颈癌的治愈率和生存率，甚至预防宫颈癌的发生。因此，有效准确的诊断手段显得尤为重要。

目前宫颈癌筛查主要有宫颈细胞学检查以及HPV检查。德国著名医学科学家Harald zur Hausen早在20世纪70年代研究发现高危型人乳头状瘤病毒(HumanPapillomavirus，HPV)感染是宫颈癌的成因。基于高危型HPV与宫颈癌之间存在明确的病因关系，HPV检测已被欧洲生殖道感染和肿瘤研究组织(EUROGIN)推荐作为宫颈癌的初筛手段。然而，HPV检测的最大局限性在于阳性预测值低。有研究表明，近90％的HPV阳性妇女是一过性感染，HPV会在2年内被机体免疫清除，仅有少数发展为持续感染，而在HPV持续感染的妇女中也仅有少数会最终发生宫颈癌，临床上，HPV检测容易导致阴道镜回叫率和宫颈活检的比例增加，造成过度诊疗，从而增加了患者的精神压力及随诊费用。宫颈细胞学检查具有高特异性和高阳性预测值的优点，已经被EUROGIN推荐作为HPV阳性妇女分层筛查方法，但其敏感性及阴性预测值均较低，结果判断有较大的主观性，而且诊断依赖于经过专业培训的细胞病理学医生。因此，我们亟需发现更加明确而有效的生物标志物，对宫颈癌及其癌前病变做出明确的辅助早期诊断，这将有助于对处于癌前病变的患者及时采取相应的措施，使癌前病变逆转为正常情况；同时可以帮助宫颈癌患者做出辅助早期诊断，有助于早期治疗，提高治愈率和生存率。