[发明专利]基于ZnO/GO复合纳米材料拮抗重金属Cd毒性的方法

权利要求书

1.一种ZnO/GO复合纳米材料在制备拮抗重金属Cd毒性药物中的应用，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一、ZnO/GO复合纳米材料的合成；

步骤二、模型细胞的培养；

步骤三、ZnO/GO复合纳米材料与重金属Cd暴露模型细胞；

步骤四、拮抗效率检测；

所述步骤一中ZnO/GO复合纳米材料的合成包括以下步骤：

①称取0.25-0.75g乙酸锌溶解于45-55mL无水乙醇中，75-85℃剧烈搅拌15-25min；

②称取0.15-0.25g氢氧化锂溶解于15-25mL无水乙醇中；

③将溶解的氢氧化锂乙醇溶液加入到25-35mL2mg/mLGO的分散液中；

④待步骤①中的乙酸锌溶液反应完全，温度降至45-55℃时，将氢氧化锂和GO的混合液加入乙酸锌溶液中，搅拌35-45min，直至反应结束；

⑤反应结束后，加入混合液两倍体积的正己烷，3-5℃静置过夜；

⑥离心弃去上清液，使用无水乙醇和超纯水分别洗涤材料，离心收集产物，即得。

2.根据权利要求1所述的ZnO/GO复合纳米材料在制备拮抗重金属Cd毒性药物中的应用，其特征在于，所述步骤三中，ZnO/GO复合纳米材料与重金属Cd暴露模型细胞的方法为方法A：使用DMEM培养基分别将ZnO/GO复合纳米材料和重金属Cd稀释至1-40μg/mL和0.5-5μg/mL，得到ZnO/GO复合纳米材料稀释液和重金属Cd稀释液，将ZnO/GO复合纳米材料稀释液与重金属Cd稀释液混合均匀后，暴露模型细胞24h。

3.根据权利要求1所述的ZnO/GO复合纳米材料在制备拮抗重金属Cd毒性药物中的应用，其特征在于，所述步骤三中，ZnO/GO复合纳米材料与重金属Cd暴露模型细胞的方法为方法B：使用DMEM培养基分别将ZnO/GO复合纳米材料和重金属Cd稀释至1-40μg/mL和0.5-5μg/mL，得到ZnO/GO复合纳米材料稀释液和重金属Cd稀释液，先使用ZnO/GO复合纳米材料稀释液预处理模型细胞1-12h，再加入重金属Cd稀释液处理模型细胞。

4.根据权利要求1所述的ZnO/GO复合纳米材料在制备拮抗重金属Cd毒性药物中的应用，其特征在于，所述步骤三中，ZnO/GO复合纳米材料与重金属Cd暴露模型细胞的方法为方法C：使用DMEM培养基分别将ZnO/GO复合纳米材料和重金属Cd稀释至1-40μg/mL和0.5-5μg/mL，得到ZnO/GO复合纳米材料稀释液和重金属Cd稀释液，先使用重金属Cd稀释液预处理模型细胞0.5-4h，再加入浓度为1-40μg/mL的ZnO/GO复合纳米材料稀释液处理模型细胞。

5.根据权利要求1所述的ZnO/GO复合纳米材料在制备拮抗重金属Cd毒性药物中的应用，其特征在于，所述步骤二中模型细胞为HepG2细胞。

6.根据权利要求5所述的ZnO/GO复合纳米材料在制备拮抗重金属Cd毒性药物中的应用，其特征在于，所述HepG2细胞的培养方法如下：

将HepG2细胞置于含有10％的胎牛血清、1％青霉素-链霉素双抗的DMEM培养基中，在37℃、5％CO₂浓度的细胞培养箱中培养24h。

7.根据权利要求6所述的ZnO/GO复合纳米材料在制备拮抗重金属Cd毒性药物中的应用，其特征在于，所述步骤①中称取0.55g乙酸锌溶解于50mL无水乙醇中，80℃剧烈搅拌20min；

步骤②中称取0.2g氢氧化锂溶解于20mL无水乙醇中；

步骤③中将溶解的氢氧化锂乙醇溶液加入30mL2mg/mLGO分散液中；

步骤④中待步骤①中的乙酸锌溶液反应完全，温度降至50℃时，将氢氧化锂和GO的混合液加入乙酸锌溶液中，搅拌40min；

步骤⑤中反应结束后，加入混合液两倍体积的正己烷，4℃静置过夜。