[发明专利]一种胶红酵母中虾青素提取及分离纯化的方法有效
| 申请号: | 201811096521.6 | 申请日: | 2018-09-19 |
| 公开(公告)号: | CN109053520B | 公开(公告)日: | 2020-09-01 |
| 发明(设计)人: | 徐春厚;刘颖;谢为天;康恺;葛叶 | 申请(专利权)人: | 广东海洋大学 |
| 主分类号: | C07C403/24 | 分类号: | C07C403/24 |
| 代理公司: | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人: | 刘瑶云;陈伟斌 |
| 地址: | 524088 *** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 酵母 中虾青素 提取 分离 纯化 方法 | ||
1.一种胶红酵母中虾青素提取及分离纯化的方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1.采用酸热法将胶红酵母干菌体细胞破壁后,离心,弃上清液,洗涤,加入浸提液,于45~55℃提取2~4次,得到虾青素粗提液;其中所述浸提液为乙酸乙酯与乙醇的混合液,所述乙酸乙酯与乙醇的体积比为0.5~3.5:1;
所述酸热法的条件为:向胶红酵母干菌体细胞中加入2~4mol/L的盐酸,混匀,室温静置30~50min,沸水浴1~5min进行破壁;
S2.向虾青素粗提液中加入KOH乙醇溶液,在4~50℃黑暗条件下皂化20min~7h后,得到皂化后的虾青素提取液;所述KOH乙醇溶液的浓度为10~20g/L;所述虾青素粗提液与KOH乙醇溶液的体积比为1:0.6~2;
S3.将虾青素提取液上样至硅胶柱层析中,以流动相进行梯度洗脱,分离得到虾青素成品;其中,所述流动相为正己烷、石油醚与乙酸乙酯的混合液,所述正己烷、石油醚与乙酸乙酯的体积比为5~7:1~2:1~2;或者所述流动相为正己烷与丙酮的混合液,所述正己烷与丙酮的体积比为2~7:1~3。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述胶红酵母干菌体细胞与盐酸的料液比为0.1:3~7g/mL。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤S1中,所述胶红酵母干菌体细胞与浸提液的料液比为0.1:5~10g/mL。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤S2中,所述皂化的条件为在20~40℃黑暗条件下皂化30~60min。
5.根据权利要求1~4任一所述的方法,其特征在于,还包括收集所述胶红酵母干菌体细胞的步骤:将胶红酵母发酵液离心后,弃上清液,用灭菌蒸馏水洗涤2~4次,将沉淀细胞于40~60℃烘干至恒重,即可得到所述胶红酵母干菌体细胞。
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