[发明专利]一种分离的核酸及其应用

说明书

本发明公开了一种分离的核酸及其应用，涉及生物分子技术领域。该核酸的碱基序列如(1)～(3)任一项所示：(1)碱基序列如SEQ ID NO.3所示；(2)第1～225位碱基序列如SEQ ID NO.1所示，第226～1737位碱基序列编码Env蛋白，Env蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示；(3)第1～225位碱基序列编码M蛋白，第226～1737位碱基序列如SEQ ID NO.2所示，M蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示。该核酸能够大量表达寨卡病毒的免疫抗原，有利于寨卡病毒疫苗或寨卡病毒治疗药物的研究。

技术领域

本发明涉及生物分子技术领域，具体而言，涉及一种分离的核酸及其应用。

背景技术

寨卡病毒(Zika virus)于1947年首次在非洲乌干达寨卡森林发现，其寄生于恒河猴体内，主要通过蚊虫叮咬传播。目前约有80％的寨卡病毒感染个体并未表现出明显的临床症状，少数有临床症状的感染个体表现为发热、皮疹、关节痛、肌肉痛、头痛、呕吐和眼结膜炎，这些临床症状通常会持续1周以上且表现较为温和。

寨卡病毒传播媒介是埃及伊蚊和白纹伊蚊，它们全年活跃在世界许多地方,包括美国南部沿海大多数州及拉丁美洲和太平洋许多度假区。寨卡病毒病除了提前预防外，尚无特效治疗方法。防止寨卡病毒感染的最有效保护方法就是防止蚊虫叮咬。

但寨卡病毒能够经胎盘屏障由孕妇垂直传给胎儿，并给胎儿造成严重后果，如导致胎儿大脑结构异常，包括脑干和小脑发育不全、延迟髓鞘形成、脑室扩大、大脑薄壁组织严重钙化以及少数的无脑回症状。与其他感染孕妇并影响多种组织器官发育的病毒不同，寨卡病毒似乎只影响神经组织。研究证明46名孕妇在产期感染了寨卡病毒后，直接导致产婴的小头畸形症且大脑严重损害。而目前尚无商业化的寨卡病毒预防性疫苗和治疗性药物。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种分离的核酸，其能够大量表达寨卡病毒的免疫抗原，有利于寨卡病毒疫苗或寨卡病毒治疗药物的研究。

本发明的第二目的在于提供一种载体，其包括有如上的核酸。

本发明的第三目的在于提供一种重组腺病毒的构建方法。

本发明的第四目的在于提供一种重组腺病毒，其由上述构建方法制得，能够表达大量复制并表达目的基因。

本发明的第五目的在于提供一种重组细胞或重组菌，培养该重组细胞或重组菌能够得到高质量的寨卡病毒的免疫抗原，有利于寨卡病毒疫苗或寨卡病毒治疗药物的研究。

本发明的第六目的在于提供一种制备Env蛋白的方法，其能够快速高效获得Env蛋白。

本发明的第七目的在于提供一种寨卡病毒疫苗。

本发明的第八目的在于提供分离的核酸、载体、或重组腺病毒在制备用于预防或治疗寨卡病毒感染的药物中的应用。

本发明是这样实现的：

一种分离的核酸，其碱基序列如(1)～(3)任一项：

(1)如SEQ ID NO.3所示；

(2)第1-225位碱基序列如SEQ ID NO.1所示，第226～1737位碱基序列编码Env蛋白，Env蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示；

(3)第1～225位碱基序列编码M蛋白，第226～1737位碱基序列如SEQ ID NO.2所示，M蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示。

在本发明一些实施方式中，分离的核酸3’端连接有PolyA序列(多聚A)，和/或分离的核酸5’端连接有信号肽。PolyA序列可为SV40PolyA序列。信号肽可为信号肽Igκ。

在本发明的一些实施方式，分离的核酸的碱基序列如SEQ IDNO.6或7所示。