[发明专利]利用乳酸菌发酵农副产品制备γ-氨基丁酸的方法

权利要求书

1.利用乳酸菌发酵农副产品制备γ-氨基丁酸的方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：

S1、配制乳酸菌悬菌液：将乳酸菌接种于液体富集培养基中，摇床培养后得到对数生长期的菌体，离心后，将菌体用生理盐水洗涤2～3次，再次离心收集，用生理盐水稀释后得到乳酸菌混悬液；

S2、乳酸菌固定：

1)用醋酸使丝胶蛋白充分溶胀，加入所述步骤S1制备得到的乳酸菌混悬液中，充分混合得到液体A；

2)向所述步骤1)得到的液体A加入纤维素并充分混合，得到液体B；

3)向所述步骤2)得到的液体B中加入含多醛基的氧化葡聚糖，在20～40℃以100～500r/min的转速振荡交联4～6h，得到固定化菌液；

4)将所述步骤3)得到的固定化菌液用pH＝6.8的0.2mol/L磷酸盐缓冲液充分洗涤后、离心，得固定化乳酸菌；

S3、发酵农副产品制备γ-氨基丁酸：将所述步骤4)得到的固定化乳酸菌接种到含农副产品的液体培养基中，充分搅拌，进行液体发酵。

2.根据权利要求1所述的利用乳酸菌发酵农副产品制备γ-氨基丁酸的方法，其特征在于，所述步骤S1中乳酸菌混悬液中的活菌数为1×10⁷～1×10⁹CFU/ml。

3.根据权利要求1所述的利用乳酸菌发酵农副产品制备γ-氨基丁酸的方法，其特征在于，所述纤维素为醋酸纤维素或羧甲基纤维素或DEAE纤维素。

4.根据权利要求1所述的利用乳酸菌发酵农副产品制备γ-氨基丁酸的方法，其特征在于，所述步骤S2中乳酸菌混悬液、丝胶蛋白、纤维素、含多醛基的氧化葡聚糖的质量比为10～20:0.8～1.6：0.5～2:0.2～0.8。

5.根据权利要求4所述的利用乳酸菌发酵农副产品制备γ-氨基丁酸的方法，其特征在于，所述步骤S2中乳酸菌混悬液、丝胶蛋白、纤维素、含多醛基的氧化葡聚糖的质量比为15:1.2：2：0.4。

6.根据权利要求1所述的利用乳酸菌发酵农副产品制备γ-氨基丁酸的方法，其特征在于，所述步骤2)中液体A与纤维素充分混合方式为：纤维素先用去离子水浸泡30-40h得到溶胀纤维素，然后将溶胀纤维素与溶液A在37℃下水浴恒温搅拌1-2h或将溶液A直接喷雾在纤维素上。

7.根据权利要求1所述的利用乳酸菌发酵农副产品制备γ-氨基丁酸的方法，其特征在于，所述步骤S3中固定化乳酸菌的接种量为0.5-5％，所述液体发酵条件为：发酵温度为30-38℃，发酵时间为20-30h，转速为100-300r/min。

8.根据权利要求7所述的利用乳酸菌发酵农副产品制备γ-氨基丁酸的方法，其特征在于，所述步骤S3中固定化乳酸菌的接种量为1％，所述液体发酵条件为：发酵温度35℃，发酵时间为24h，发酵摇瓶转速150r/min。

9.根据权利要求1所述的利用乳酸菌发酵农副产品制备γ-氨基丁酸的方法，其特征在于，所述步骤S3中含农副产品的液体培养基的组份包括葡萄糖20-30g/L、糙米40-50g/L、玉米粉15-20g/L，大豆粉5-10g/L，谷氨酸钠5-10g/L,VB 15-20mg/L，VH 5-10mg/L。

10.根据权利要求9所述的利用乳酸菌发酵农副产品制备γ-氨基丁酸的方法，其特征在于，含农副产品的液体培养基的组份包括葡萄糖30g/L、糙米40g/L、玉米粉20g/L、大豆粉10g/L、谷氨酸钠8g/L、VB0.02g/L和VH0.01g/L。