[发明专利]靶向前列腺癌的重组溶瘤腺病毒及其构建方法和应用

权利要求书

1.一种靶向前列腺癌的重组溶瘤腺病毒Onco^Ad-DD3-E1A-△E1B-mK5，其特征在于，所述重组溶瘤腺病毒Onco^Ad-DD3-E1A-△E1B-mK5由DD3启动子驱动腺病毒E1A基因，腺病毒基因组敲除了E1B基因区域，同时，插入外源基因mk5。

2.一种靶向前列腺癌的重组溶瘤腺病毒Onco^Ad-DD3-E1A-△E1B-mK5，其特征在于，所述重组溶瘤腺病毒Onco^Ad-DD3-E1A-△E1B-mK5与多西他赛具有协同增效抗癌作用。

3.一种如权利要求2所述的重组溶瘤腺病毒Onco^Ad-DD3-E1A-△E1B-mK5的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一、穿梭质粒Pshuttle-mK5-DD3-E1A-△E1B的构建

利用PCR的方法，将载体Pshuttle-DD3-E1A-△E1B与mK5基因连接到一起，构建穿梭质粒Pshuttle-mK5-DD3-E1A-△E1B；

步骤二、利用PmeI酶切穿梭质粒，然后转化到含有pAdEasy-1质粒的BJ5183感受态细胞中，使二者发生同源重组，以卡那霉素筛选鉴定以获得pAdEasy-mK5-DD3-E1A-△E1B；

步骤三、利用PacI酶切质粒pAdEasy-mK5-DD3-E1A-△E1B，用Effectene转染试剂将酶切后获得片段转染入人胚胎肾细胞HEK-293中产生重组溶瘤腺病毒O^Ad.mK5。

4.一种如权利要求1所述的重组溶瘤腺病毒Onco^Ad-DD3-E1A-△E1B-mK5在制备治疗前列腺癌药物中的应用。

5.一种如权利要求1所述的重组溶瘤腺病毒Onco^Ad-DD3-E1A-△E1B-mK5在制备协同增效治疗前列腺癌的药物中的应用。

6.一种治疗前列腺癌的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括权利要求1所述的重组溶瘤腺病毒Onco^Ad-DD3-E1A-△E1B-mK5。

7.一种具有协同增效的治疗前列腺癌的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括权利要求1所述的重组溶瘤腺病毒Onco^Ad-DD3-E1A-△E1B-mK5和多西他赛。