[发明专利]一种极度濒危植物贵州大花杜鹃的组培繁殖及离体保存方法有效
| 申请号： | 201811007683.8 | 申请日： | 2018-08-31 |
| 公开（公告）号： | CN108935106B | 公开（公告）日： | 2021-12-21 |
| 发明（设计）人： | 田晓玲;马永鹏;乔琴;路登宇;何娇;朱强 | 申请（专利权）人： | 贵州思源农旅综合开发有限公司 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 553539 贵州*** | 国省代码： | 贵州;52 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 极度 濒危 植物 贵州 杜鹃 繁殖 保存 方法 | ||
1.一种极度濒危植物贵州大花杜鹃的组培繁殖及离体保存方法，其特征在于：1)外植体选择：取贵州大花杜鹃的新嫩茎段，用自来水冲洗12h后备用；2)外植体灭菌：取备好的外植体在无菌超净台上，用75％的酒精消毒30s，用无菌水冲洗3-5遍，用0.1％氯化汞消毒8-9min，使用无菌水冲洗3-5遍；3)丛生芽诱导：丛芽诱导培养基为改良WPM+2.5mg/L2-iP+0.8mg/L IBA，蔗糖28g/L，琼脂7g/L，pH5.6；改良WPM培养基为硝酸铵提高至为700mg/L，其他元素用量保持不变，将经过外植体灭菌过程后得到的茎段，在超净台上，用无菌滤纸吸干表面水分，用无菌刀切割茎段，每段带一个潜伏芽，接种至丛生芽诱导培养基内，暗培养5天后进行光照培养30天以上,培养35-50天，光暗时间为12h/12h，光照强度为1500-2000LUX；4)壮苗培养：壮苗培养基为改良WPM+0.5mg/L 2-iP+0.1mg/L IBA，蔗糖28g/L，琼脂7g/L，pH5.6；将诱导出的新芽，接种至壮苗培养基内，将瓶苗处于光暗时间为12h/12h，光照强度为1500-2000LUX；5)离体保存：离体保存培养基为改良WPM+0.5mg/L IBA+6mg/L CCC，pH5.6，蔗糖28g/L，琼脂6-7g/L，温度为13-18℃，光强度为1500LUX-1600LUX，光暗时间为10h/14h；恢复生长分化培养基为改良WPM+1mg/L6-BA+0.05mg/L IAA，光暗时间为12h/12h，光照强度为1500-2000LUX；6)生根培养：将生长至1.5cm～2cm高的芽苗转接至培养基为改良WPM+1mg/L IBA的培养基中，附加蔗糖28g/L，琼脂7g/L，pH5.6；光强度为2000LUX-2500LUX，光暗时间为12h/12h；
以上培养基除离体保存培养基外，各培养基均使用260ml培养瓶灌装45ml培养基；离体保存培养基为260ml培养瓶灌装65ml培养基，培养温度除离体保存为13-18℃，其余均为20-23℃。
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