[发明专利]一种生物芯片及其制备和应用

权利要求书

1.一种低背景的细胞检测用生物芯片，其特征在于，包括：

一基片，所述基片包括基底片和修饰层，所述修饰层包括活性氨基层和聚乙二醇层；所述活性氨基层通过共价键连接在基底片上，所述聚乙二醇层通过共价键连接在活性氨基层上；其中，所述聚乙二醇含有7-12个乙二醇单元；和

功能分子层，所述功能分子层连接在所述聚乙二醇层上。

2.如权利要求1所述的生物芯片，其特征在于，所述基底片为玻璃基片。

3.如权利要求1所述的生物芯片，其特征在于，所述聚乙二醇含有8-12个乙二醇单元。

4.一种根据权利要求1所述生物芯片的制备方法，其特征在于，包括步骤：

(1)预处理基底片：清洗基底片表面后用UV照射基底片表面，从而得到表明经预处理的基底片；

(2)引入活性氨基层：将表面经预处理的基底片与活性氨基化合物进行反应，在基底片表面引入活性氨基后，对基片进行退火处理，从而得到表面引入活性氨基层的基片；

(3)引入聚乙二醇层：将表面引入活性氨基层的基片与末端异功能化聚乙二醇进行反应，和

(4)然后将功能分子与所述末端异功能化聚乙二醇相连接，以形成功能分子层，从而得到权利要求1所述生物芯片。

5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述活性氨基化合物为3-氨丙基二乙氧基硅烷。

6.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述退火处理在80-100℃的真空环境下进行。

7.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，所述末端异功能化聚乙二醇的一端端基为N-羟基琥珀酰亚胺，另一端端基为羟基、马来酰亚胺、丙烯酸酯、叠氮、炔基、邻二硫吡啶基、巯基、生物素、金刚烷、环糊精中的任意一种。

8.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤(4)中，所述功能分子经末端官能化从而与所述末端异功能化聚乙二醇相连接。

9.如权利要求8所述的制备方法，其特征在于，末端官能化的功能分子的一端末端为卤素、羧基、活性酯基团、酰氯、环氧烷、巯基、烯烃基团、炔基、叠氮、马来酰亚胺、邻二硫吡啶基、环糊精、金刚烷中的任意一种。

10.如权利要求9所述的制备方法，其特征在于，所述末端官能化的功能分子的一端末端为卤素、巯基或马来酰亚胺。

11.一种高通量筛选功能分子的方法，其特征在于，包括步骤：

(a) 测试如权利要求1所述生物芯片的空白基片与细胞相互作用；

(b) 将待筛选分子与权利要求1所述生物芯片的基片的聚乙二醇层连接，形成如权利要求1所述的生物芯片；

(c) 测试步骤(b)得到的芯片与细胞的相互作用；和

(d) 若步骤(a)的结果显示所述空白基片与细胞无相互作用或基本上无相互作用，而步骤(c)的结果显示步骤(b)得到的芯片与细胞有相互作用，则该待筛选分子为功能分子。

12.如权利要求11所述的方法，其特征在于，所述功能分子为尼龙-3聚合物。

13.根据权利要求1所述生物芯片的用途，其特征在于，用于检测功能分子与细胞的作用。

14.一种检测方法，其特征在于，用权利要求1所述的生物芯片来检测细胞的粘附数量和细胞形态，且所述的生物芯片中的功能分子为尼龙-3聚合物。

15. 如权利要求14所述的检测方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(i) 将细胞接种于权利要求1所述的生物芯片并一起孵育。