[发明专利]鳄鱼甲有效组分的制备及其抗氧化、抗肝纤维化的应用

说明书

本发明提供了鳄鱼甲有效组分的制备方法，是以鳄鱼甲提取物为起始材料，经超滤后获得的分子量大于100kD、50‑100kD和小于50kD组分、经乙醇沉淀的粗多糖、粗多糖经酶解和溶媒提取，除去蛋白的精多糖组分。这些有效组分均能在一定程度上改善四氯化碳诱导小鼠的肝纤维化情况，尤其是鳄鱼甲精多糖和分子量大于100kD的效果最为显著；并且鳄鱼甲多糖能有效的减缓D‑半乳糖诱导的小鼠衰老情况。因此，本发明物有望在应用于制备抗氧化、减缓衰老、防治肝纤维化的药物。

技术领域

本发明属于医药技术领域，涉及到一种治疗肝纤维化及延缓衰老的中药提取物及其应用。

背景技术

肝纤维化(Hepatic fibrosis,HF)是各种慢性肝病发展成为肝硬化，甚至肝癌的必经阶段，也是在肝病发展过程中一个可逆的阶段，因此成为肝病治疗的首选靶向性区段。肝纤维化为肝脏受到损伤后组织在自我修复过程中出现的代偿性产物，最具有代表性的是肝组织内细胞外基质(Extracellular Matrix，ECM)的过度沉积；此外，自由基通过诱导脂质过氧化反应，引起肝纤维化细胞的分化和增殖，是刺激肝纤维化发生的另一途径。目前，对肝纤维化发病机制的研究，在世界范围内取得突破性的进展，然而在肝纤维化的预防和治疗方面却依然是科学界所面临的巨大挑战。

现代医学研究证明,自由基诱导的氧化损伤与多种疾病的发生发展关系密切，因此适当补充抗氧化剂对提高机体抗氧化能力,增进身体健康具有重要意义。多糖因具有优异的抗氧化、清除自由基等作用，且具有高效、低毒、高生物利用率的特点，在预防和治疗由自由基引起的疾病如肿瘤、炎症等方面显示出独特的优越性。

古代医籍和现代医学研究都表明，鳄鱼甲能够调和脾胃、疏肝解郁，含有强有力的抗癌物质和防止癌肿瘤新生细胞的生长因子，这种因子的抑癌效果是其它爬行动物的数万倍。将其提取物与中药配伍，具有极强的“走窜行散、活血化淤、通利经络、透达关窍”的功能，能够直接破坏癌细胞的外围防护因子，发挥其对癌细胞的杀灭作用。然而鳄鱼甲为原料的有效成份在抗肝纤维化、保肝作用研究成果还比较少，迄今为止，尚无相关报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种具有治疗肝纤维化的鳄鱼甲有效组分及其应用，以及所述鳄鱼甲有效组分抗衰老的作用。

本发明提供所述鳄鱼甲有效组分是以鳄鱼甲提取物为起始材料，经超滤后获得的大于100kD、50-100kD和小于50kD不同分子量的组分、经乙醇沉淀的粗多糖、粗多糖经酶解和溶媒提取，除去蛋白的精多糖组分。

本发明所述鳄鱼甲有效组分的剂型可以是多种制剂，优选为口服制剂。

本发明提供了鳄鱼甲有效组分在制备抗肝纤维化药物中的应用。为此，选择经典的小鼠腹腔注射四氯化碳(CCl₄)诱导化学性肝损伤构建的肝纤维化模型，采用鳄鱼甲提取物各组分以1.35g/kg(体质量)治疗用药。通过对小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、白蛋白(ALB)和总胆红素(TBIL)肝功能指标的检测，血清中透明质酸(HA)、三型胶原(C-Ⅲ)、四型胶原(C-Ⅳ)和层粘连蛋白(LN)等肝纤维化指标的检测以及肝组织羟脯氨酸(Hyp)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)等氧化指标的检测；并通过肝脏外观和肝组织病理切片观察肝脏的病理变化。结果显示：鳄鱼甲有效组分与模型组相比，均能在一定程度上降低小鼠血清和肝脏中各检测指标的含量。所以说，鳄鱼甲有效组分对CCl₄诱导肝纤维化均有一定程度的保护作用，其中抗肝纤维化效果最佳的是：鳄鱼甲精多糖和分子量大于100kD的组分。

本发明进一步包括鳄鱼甲多糖在制备抗氧化药物中的应用。