[发明专利]一种脑微细血管分离提纯方法

权利要求书

1.一种脑微细血管分离提纯方法，其特征在于，包括：

利用杜恩斯匀浆器研磨小鼠脑组织，制备小鼠脑组织匀浆液；

小鼠脑组织匀浆液经无菌磁珠和细胞滤器过滤，得到纯化的脑血管和微血管组织；

所述利用杜恩斯匀浆器研磨小鼠脑组织，制备小鼠脑组织匀浆液中还包括：

所述小鼠脑组织匀浆液离心后，用4℃的含17％葡聚糖的20毫摩尔HEPES-DMEM重悬组织沉淀，4℃条件下10000g离心30分钟，去除上清液和脂肪层，不要触碰到含有脑血管和微血管的沉淀物；

所述含有脑血管和微血管的沉淀物用4℃的含10％胎牛血清的20毫摩尔HEPES-DMEM重悬，获得组织悬液；

所述小鼠脑组织匀浆液经无菌磁珠和细胞过滤器过滤，得到纯化的脑血管和微血管组织中还包括：

将高压灭菌的无菌磁珠置于细胞过滤器中，无菌磁珠填充满细胞过滤器，使所述组织悬液与无菌磁珠接触；

将所述无菌磁珠全部倒入组织培养皿中，向组织培养皿中加入所述含10％胎牛血清的20毫摩尔HEPES-DMEM，轻摇所述细胞过滤器和所述组织培养皿；

重复所述向组织培养皿中加入含10％胎牛血清的20毫摩尔HEPES-DMEM，轻摇所述细胞过滤器和所述培养皿的步骤至少三次。

2.根据权利要求1所述的一种脑微细血管分离提纯方法，其特征在于，所述小鼠脑组织为小鼠的新鲜全脑组织。

3.根据权利要求1所述的一种脑微细血管分离提纯方法，其特征在于，所述利用杜恩斯匀浆器研磨小鼠脑组织，制备小鼠脑组织匀浆液中还包括：

所述小鼠脑组织经杜恩斯匀浆器缓慢研磨12-15次获取小鼠脑组织匀浆液，且避免产生气泡。