[发明专利]一种可检测8-OHdG的金、银纳米粒子手性二聚体在审
| 申请号: | 201810803481.8 | 申请日: | 2018-07-20 |
| 公开(公告)号: | CN109187446A | 公开(公告)日: | 2019-01-11 |
| 发明(设计)人: | 匡华;王秀秀;胥传来;徐丽广;马伟;刘丽强;吴晓玲;宋珊珊;胡拥明 | 申请(专利权)人: | 江南大学;无锡迪腾敏生物科技有限公司 |
| 主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64;B82Y30/00 |
| 代理公司: | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人: | 张勇 |
| 地址: | 214000 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 二聚体 纳米粒子 金 银 手性 可检测 分析化学技术 生物相容性 细胞 高灵敏度 高稳定性 高选择性 含量变化 荧光信号 原位成像 高产率 检测 应用 | ||
1.一种可检测8-OHdG的金、银纳米粒子手性二聚体,其特征在于,所述金、银纳米粒子手性二聚体包含通过DNA3聚合在一起的聚合体1以及聚合体2;所述聚合体1是金纳米粒子与DNA1的聚合体;所述聚合体2是银纳米粒子与DNA2的聚合体;所述DNA3是8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)的适配体序列;所述DNA1与DNA2分别与DNA3互补;所述DNA3的一端修饰有Cy5。
2.如权利要求1所述的一种可检测8-OHdG的金、银纳米粒子手性二聚体,其特征在于,所述手性二聚体需与穿膜肽(TAT)进行偶联,得到表面修饰有穿膜肽的金、银纳米粒子手性二聚体。
3.如权利要求1或2所述的一种可检测8-OHdG的金、银纳米粒子手性二聚体的制备方法,其特征在于,所述方法为将金纳米粒子与银纳米粒子重悬于缓冲液中,得到含有金纳米粒子的缓冲液和含有银纳米粒子的缓冲液;分别向含有金纳米粒子的缓冲液和含有银纳米粒子的缓冲液中加入8-OHdG适配体序列的互补序列DNA1、DNA2进行反应,得到含有聚合体1的反应液1和含有聚合体2的反应液2;将反应液1和反应液2离心去上清除去未反应的DNA,用缓冲液重悬,得到重悬液1和重悬液2;将重悬液1和重悬液2混合并加入修饰有Cy5的8-OHdG适配体序列DNA3,并加入NaCl溶液进行反应,得到含有二聚体的反应液3;将反应液3离心去上清除去未反应的DNA3,并用缓冲液重悬,得到重悬液3;将重悬液3与穿膜肽混合进行偶联,得到含有表面修饰有穿膜肽的金、银纳米粒子手性二聚体的反应液4;将反应液4离心去除上清,得到表面修饰有穿膜肽的金、银纳米粒子手性二聚体。
4.如权利要求3所述的一种可检测8-OHdG的金、银纳米粒子手性二聚体的制备方法,其特征在于,所述DNA1、DNA2、DNA3的核苷酸序列分别为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ IDNO.3;所述穿膜肽的核苷酸序列为SEQ ID NO.4。
5.如权利要求3或4所述的一种可检测8-OHdG的金、银纳米粒子手性二聚体的制备方法,其特征在于,所述含有金纳米粒子的缓冲液中,金纳米粒子的浓度为9-11nmol/L;含有银纳米粒子的缓冲液中,银纳米粒子的浓度为9-11nmol/L。
6.如权利要求3-5任一所述的一种可检测8-OHdG的金、银纳米粒子手性二聚体的制备方法,其特征在于,所述DNA1与金纳米粒子的摩尔比为9-(11:1);所述DNA2与银纳米粒子的摩尔比为9-(11:1)。
7.如权利要求3-6任一所述的一种可检测8-OHdG的金、银纳米粒子手性二聚体的制备方法,其特征在于,所述DNA3与聚合体1与聚合体2的摩尔比均为9-(11:1)。
8.如权利要求3-7任一所述的一种可检测8-OHdG的金、银纳米粒子手性二聚体的制备方法,其特征在于,所述重悬液3中二聚体、SH-PEG-5000、穿膜肽的摩尔比为(1:450)-(550:1500)-2500。
9.应用权利要求3-8任一所述的一种可检测8-OHdG的金、银纳米粒子手性二聚体的制备方法制备得到的金、银纳米粒子手性二聚体。
10.权利要求1或2所述的一种可检测8-OHdG的金、银纳米粒子手性二聚体或权利要求3-8任一所述的一种可检测8-OHdG的金、银纳米粒子手性二聚体的制备方法或权利要求9所述的制备得到的金、银纳米粒子手性二聚体在检测8-OHdG、检测DNA损伤方面的应用。
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