[发明专利]测量细胞介导免疫反应的试验

说明书

本发明一般涉及基于免疫学的诊断试验领域。更特定地，本发明描述检测细胞介导免疫反应的方法。本发明还能测定病情，治疗试剂和环境污染物的免疫抑制作用。本发明的试验也能整合到病理学架构中以提供诊断报告系统和促进临床护理管理。

申请数据

本发明与2009年12月23号提交的题为“An Assay(试验)”的美国临时专利申请号61/289,880相关并要求优先权，其全部内容通过引用纳入本文。

技术领域

本发明一般涉及基于免疫学诊断试验的领域。更特别地，本发明考虑检测细胞介导免疫反应的方法。本发明还能测定病情、治疗剂和环境污染物的免疫抑制作用。本发明的试验也能整合到病理学架构中以提供诊断报告系统和促进临床护理管理。

背景技术

关于本说明书中作者的发表物详细书目在说明的结尾按字母顺序集中。

在该说明书中参考的任何现有技术不应认为或不应作为承认或任何形式暗示表明该现有技术在任何国家中构成一般常识的一部分。

基于免疫学的诊断提供检测各种病情的重要工具。考虑到免疫系统内组分的特异性，更是如此。尽管有此特异性，基于免疫学的诊断并不总是必须有足够敏感性以检测低水平的适应性和/或先天免疫活性，例如响应低度感染或出现持续低水平感染或显示免疫缺陷或任何免疫抑制形式的对象。因为适应性和先天免疫潜能，需要发展与细胞介导免疫反应相关的敏感性增强的诊断方法。在对已接触或正在显示诱导或关联免疫抑制的病情和试剂的对象尤其如此。

基于免疫学的一种诊断方法形式涉及在分离细胞培养或全血液培养中用抗原或有丝分裂原激活T细胞，然后是检测效应分子，例如活化T细胞(也称为效应T细胞)生成的细胞因子。效应分子一般用诸如酶免疫分析，多元珠分析，酶联免疫斑点法(ELISpot)和流式细胞仪等技术检测。这些试验用于检测疾病特异性T细胞反应。

评价对象的细胞介导免疫反应的能力在控制免疫缺陷和免疫抑制中特别重要。免疫缺陷的表征是有效增加免疫反应的能力下降。这种反应的受损或缺失可能来自原发性或获得性(继发性)免疫缺陷。

原发性免疫缺陷(PID)可基因遗传，且表征为获得性或先天免疫系统的独特成分缺失(Hu和Gatti，Curr Opin Allergy Clin Immunol.8(6):540–546，2008)。然而，大部分免疫缺陷是获得性(继发性)，并能由病原试剂诱导，如随着HIV感染发生；由药物诱导，如器官移植后免疫抑制治疗；由病情诱导，如在癌症(如白血病，淋巴瘤)中发生；或由环境污染物和污染物质诱导。

免疫缺陷的分子基础多样化，然而，细胞介导免疫在调节很多观察到的临床表现中有重要作用。目前，免疫缺陷综合征以依赖于病原的特定方式诊断和管理。

例如，HIV感染的主要特点是CD4⁺ T细胞逐渐丧失和整体免疫功能受损，包括对病原例如巨细胞病毒(CMV)和乙型肝炎病毒(HBV)的抗原特异性获得性免疫反应受损(Douek等，Annu.Rev.Med.60:471-84，2009和Chang等，J.Virol.83:7649-58，2009)。因此，CD4⁺ T计数和病毒载量是HIV感染的重要替代标记，并已经广泛作为免疫功能障碍和预防治疗后渐进感染及免疫重建的有效预测(Hengel和Kovacs，J.Infect.Dis.188(12):1791-3，2003)。然而，当机会性感染在正常CD4⁺ T细胞计数和低病毒载量存在情况下出现时，很多情况中临床疾病不与这些替代标记特定预测的免疫功能水平相关(Solomon等，J.Infect.Dis.187：1915-23，2003)。