[发明专利]可分泌抗Ad3FK单克隆抗体的杂交瘤细胞、单克隆抗体及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及一种可分泌抗Ad3FK单克隆抗体的杂交瘤细胞、单克隆抗体及其制备方法和应用。一种可分泌抗Ad3FK单克隆抗体的杂交瘤细胞，保藏号为CCTCC No：C201875。上述杂交瘤细胞分泌得到的抗Ad3FK的单克隆抗体，具有高特异性、性能稳定等优点，能够特异性地结合人3型腺病毒，可广泛应用在制备治疗感染人3型腺病毒的相关疾病的药物中，也可用于制备检测人3型腺病毒的检测试剂或检测设备中。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种可分泌抗Ad3FK单克隆抗体的杂交瘤细胞、单克隆抗体及其制备方法和应用。

背景技术

至今已发现的人腺病毒(human Adenovirus，HAdV)有7组50多种血清型，超过69种基因型。腺病毒是致病毒性肺炎的主要病原体之一，B组、C组、E组腺病毒都可以引起呼吸道感染，其中人B组腺病毒的3型、7型、14型、55型和E组4型腺病毒是致急性呼吸道感染(ARI)和婴幼儿致死性肺炎的重要病原体，传染性强，常导致爆发流行。

国内人腺病毒的流行毒株主要为3型腺病毒，尤其在婴幼儿腺病毒感染中，人3型腺病毒是致急性呼吸道感染及重症肺炎的最主要的病原体，并且传染性强，常导致爆发流行。另外，人3型腺病毒也常常导致眼角膜结膜炎和咽结膜热。

因此，人3型腺病毒的致病危害性使得其防治显得十分重要。但目前针对人3型腺病毒人还没有特异有效的治疗药物。

发明内容

基于此，有必要提供一种可分泌抗Ad3FK单克隆抗体的杂交瘤细胞、单克隆抗体及其制备方法和应用。

一种可分泌抗Ad3FK单克隆抗体的杂交瘤细胞，保藏号为CCTCC No：C201875。

在其中一个实施例中，上述杂交瘤细胞分泌的抗Ad3FK单克隆抗标记为1B5。

一种抗Ad3FK单克隆抗体，所述抗Ad3FK单克隆抗体的轻链包括如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列，所述抗Ad3FK单克隆抗体的重链包括如SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列。

在其中一个实施例中，编码所述抗Ad3FK单克隆抗体的轻链的基因包括如SEQ IDNO.3所示的碱基序列，编码所述抗Ad3FK单克隆抗体的重链的基因包括如SEQ ID NO.4所示的碱基序列。

一种治疗感染人3型腺病毒相关疾病的药物，其特征在于，上述杂交瘤细胞或如上述抗Ad3FK单克隆抗体。

一种检测试剂，包括上述杂交瘤细胞或如上述抗Ad3FK单克隆抗体。

一种可分泌抗Ad3FK单克隆抗体的杂交瘤细胞的制备方法，包括如下步骤：

将Ad3FK抗原与弗氏完全佐剂按体积比1:1混合，得到乳化剂；

将所述乳化剂以40μg/只～80μg/只的抗原剂量免疫BALB/c小鼠，饲养2周～3周后，得到初次免疫的小鼠；

将所述Ad11FK抗原与弗氏不完全佐剂按体积比1:1混合后以40μg/只～80μg/只的抗原剂量对所述初次免疫的小鼠进行加强免疫，饲养2周～3周后，得到加强免疫的小鼠；

用所述Ad3FK抗原以20μg/只～50μg/只的抗原剂量对将所述加强免疫的小鼠进行脾内冲击免疫，饲养2天～4天后，得到冲击免疫的小鼠；

采集所述冲击免疫的小鼠的脾细胞；及

将所述脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，得到融合细胞；及

用所述Ad3FK抗原筛选所述融合细胞，得到阳性融合细胞，并将所述阳性融合细胞克隆，得到稳定分泌1B5的杂交瘤细胞。

在其中一个实施例中，所述将所述脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，得到融合细胞的步骤，包括：