[发明专利]靶向鼠源的嵌合抗原受体及其用途

权利要求书

1.一种融合蛋白，所述融合蛋白选自：

(1)含有依次连接的信号肽、抗CD19单链抗体、鼠CD28跨膜区、鼠CD28胞内区和鼠CD3ζ胞内区和GFP序列的融合蛋白；和

(2)在(1)限定的氨基酸序列中经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且保留活化T细胞活性的由(1)衍生的融合蛋白；

优选地，所述抗CD19单链抗体为抗CD19单克隆抗体1D3。

2.如权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白具有以下一个或多个特征：

所述信号肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:1第1-21位氨基酸所示；

所述抗CD19单链抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:1第22-127位氨基酸所示；

所述抗CD19单链抗体的重链可变区的氨基酸序列可如SEQ ID NO:1第143-258位氨基酸所示；

所述鼠CD28跨膜和胞内区的氨基酸序列如SEQ ID NO:1第259-362位氨基酸所示；和

所述鼠CD3ζ胞内区的氨基酸序列如SEQ ID NO:1第363-475位氨基酸所示；

所述GFP的氨基酸序列如SEQ ID NO:1第502-740位氨基酸所示。

3.如权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白的氨基酸序列由SEQ IDNO:1依次串联形成。

4.一种多核苷酸序列，该多核苷酸序列选自：

(1)编码权利要求1－3中任一项所述融合蛋白的多核苷酸序列；和

(2)(1)所述多核苷酸序列的互补序列；

优选地，所述多核苷酸序列含有SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列，或由SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列依此串联而成。

5.一种核酸构建物，所述核酸构建物含有权利要求4所述的多核苷酸序列；

优选地，所述核酸构建物为载体；

更优选地，所述核酸构建物为逆转录病毒载体，含有复制起始位点，3’LTR，5’LTR，以及权利要求4所述的多核苷酸序列。

6.一种逆转录病毒，所述逆转录病毒含有权利要求5所述的核酸构建物，优选含有所述载体，更优选含有所述逆转录病毒载体。

7.一种离体活化T细胞的方法，所述方法包括使用权利要求6所述的逆转录病毒感染所述T细胞的步骤。

8.一种基因修饰的T细胞或含该基因修饰的T细胞的药物组合物，其特征在于，所述细胞含有本文权利要求4所述的多核苷酸序列，或含有权利要求5所述的逆转录病毒载体，或感染了权利要求6所述的逆转录病毒，或采用权利要求7所述的方法制备得到。

9.权利要求1－3中任一项所述的融合蛋白、权利要求4所述的多核苷酸序列、权利要求5所述的载体或权利要求6所述的逆转录病毒在制备活化的T细胞中的应用。

10.权利要求1－3中任一项所述的融合蛋白、权利要求4所述的多核苷酸序列、权利要求5所述的载体、权利要求6所述的逆转录病、或权利要求8所述的基因修饰的T细胞在制备治疗鼠CD19介导的疾病的药物中的用途；

优选地，所述鼠CD19介导的疾病包括鼠的白血病和淋巴瘤；

更优选地，所述鼠CD19介导的疾病包括鼠的B细胞淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、急性淋巴细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病、多毛细胞白血病、和急性髓性白血病。