[发明专利]一种多排高通量聚丙烯酰胺凝胶、电泳系统及电泳方法在审
| 申请号: | 201810718668.8 | 申请日: | 2018-07-03 |
| 公开(公告)号: | CN109030607A | 公开(公告)日: | 2018-12-18 |
| 发明(设计)人: | 昌增益;刘洋;余家钰 | 申请(专利权)人: | 北京大学 |
| 主分类号: | G01N27/447 | 分类号: | G01N27/447 |
| 代理公司: | 北京三聚阳光知识产权代理有限公司 11250 | 代理人: | 李敏 |
| 地址: | 100871*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 电泳 聚丙烯酰胺凝胶 电泳系统 蛋白样品 凝胶缓冲 高通量 阳离子 阴离子 多排 免疫印迹检测 电泳迁移 分离凝胶 凝胶染色 设备兼容 水平电泳 常规的 分辨率 水平排 应用性 上样 条带 检测 | ||
1.一种多排的高通量水平连续电泳聚丙烯酰胺凝胶,其特征在于:包括:凝胶缓冲液和分离凝胶;所述凝胶缓冲液包括电泳阳离子和电泳阴离子;所述电泳阳离子的浓度为25mM-200mM;所述电泳阴离子的浓度为25mM-200mM。
2.根据权利要求1所述多排的高通量水平连续电泳聚丙烯酰胺凝胶,其特征在于,所述电泳阳离子的浓度为50mM-160mM;所述电泳阴离子的浓度为40mM-150mM;优选的,所述电泳阳离子的浓度为60mM-140mM;所述电泳阴离子的浓度为60mM-140mM;优选的,所述电泳阳离子的浓度为65mM-120mM;所述电泳阴离子的浓度为70mM-120mM。
3.根据权利要求1或2所述多排的高通量水平连续电泳聚丙烯酰胺凝胶,其特征在于,所述多排的高通量水平连续电泳聚丙烯酰胺凝胶的pH值为6.5-9.5。
4.根据权利要求1-3任一项所述多排的高通量水平连续电泳聚丙烯酰胺凝胶,其特征在于,所述电泳阳离子选自三羟甲基氨基甲烷、双(2-羟基乙胺基)三(羟甲基)甲烷、乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺和碳酸氢铵中的至少一种;
所述电泳阴离子选自甘氨酸、N-(三羟甲基)甲基甘氨酸、硼酸、哌嗪-N,N-二(2-乙磺酸)、羟乙基哌嗪乙硫磺酸、3-吗啉丙磺酸、N-环己基-2-氨基乙磺酸、3-(环己氨基-1-丙磺酸)、N-(2-羟乙基)哌嗪-N-(2-羟基丙磺酸)和碳酸氢铵中的至少一种。
5.根据权利要求1-4任一项所述多排的高通量水平连续电泳聚丙烯酰胺凝胶,其特征在于,所述电泳阳离子与电泳阴离子的pKa值相差不大于2.2个pKa单位;优选的,电泳阳离子与电泳阴离子的pKa值相差不大于1.5个pKa单位。
6.根据权利要求1-5任一项所述多排的高通量水平连续电泳聚丙烯酰胺凝胶,其特征在于,所述的凝胶缓冲液中还包括蛋白质变性剂;优选的,所述蛋白质变性剂为十二烷基磺酸钠,质量体积比为0.08-0.12%。
7.根据权利要求1-6任一项所述多排的高通量水平连续电泳聚丙烯酰胺凝胶,其特征在于,所述的凝胶缓冲液中还包括甘油,体积比浓度为0%-15%,且不为0%。
8.根据权利要求1-7任一项所述多排的高通量水平连续电泳聚丙烯酰胺凝胶,其特征在于,所述的分离凝胶包含质量体积比为5%-15%的丙烯酰胺。
9.根据权利要求1-8任一项所述多排的高通量水平连续电泳聚丙烯酰胺凝胶,其特征在于,所述的分离凝胶包含丙烯酰胺交联剂;优选的,丙烯酰胺交联剂为质量体积比为0.1%-1.5%的甲叉双丙烯酰胺。
10.根据权利要求1-9任一项所述多排的高通量水平连续电泳聚丙烯酰胺凝胶,其特征在于,所述的分离凝胶包含质量体积比为0.05%-0.1%的过硫酸铵。
11.根据权利要求1-10任一项所述多排的高通量水平连续电泳聚丙烯酰胺凝胶,其特征在于,所述的分离凝胶包含体积比浓度为0.1%-0.4%的四甲基乙二胺。
12.一种多排的高通量水平连续电泳系统,其特征在于,包括权利要求1-11任一项所述多排的高通量水平连续电泳聚丙烯酰胺凝胶。
13.根据权利要求12所述多排的高通量水平连续电泳系统,其特征在于,还包括电泳缓冲液,所述电泳缓冲液与凝胶缓冲液相同。
14.根据权利要求12或13所述多排的高通量水平连续电泳系统,其特征在于,还包括制样缓冲液,所述的制样缓冲液的pH值为6.6-7.0。
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