[发明专利]一套HDACs核酸适配体

说明书

本发明公开一套HDACs核酸适配体，属于基因工程、免疫学和肿瘤学技术领域。所述的适配体为SEQ ID NO：1~5中所示的核苷酸序列中的任意一条或几条序列。本发明核酸适配体利用蛋白SELEX技术筛选而得，分子量较小，易于合成与修饰，能够高特异性识别并且高亲和力结合HDACs，与其它蛋白不发生特性结合，无免疫原性，稳定易修饰，便于合成和保存。用所述适配体制备的HDACs检测试剂盒和试剂纸对HDACs检测灵敏度高，且易于优化。在肿瘤诊断、肿瘤预后与监测的评估，肿瘤诊断中应用。

技术领域

本发明属于基因工程、免疫学和肿瘤学技术领域，特别涉及一套HDACs核酸适配体。

背景技术

癌症通常被认为是一种由致癌基因激活或肿瘤抑制基因丢失导致的遗传缺陷疾病。 然而，表观遗传变化包括组蛋白乙酰化，也有助于肿瘤的发展。组蛋白乙酰转移酶和脱乙酰基酶（HDACs）在染色质结构修饰和基因表达中发挥重要作用。组蛋白乙酰转移酶失活与肿瘤发生有关。异常的HDAC活性被认为是肿瘤形成中的关键，因为HDAC过度不适当的活性抑制肿瘤抑制基因的转录。

核酸适配体是经过筛选得到的用于结合特定靶标的短的单链DNA‍（single-stranded DNA, ssDNA）或RNA分子，具有易于合成，免疫原性较低，分子量小（10-15kDa）等优势。因为具有与抗体类似的作用，因此又被称为“化学抗体”。核酸适配体的出现为化学生物学界和生物医学界提供了一种新的识别工具，尤其在肝癌早期诊断方面展示了良好的应用前景。目前尚未有HDACs适配体筛选的报道，若能够筛选出能够特异性结合HDACs的适配体，无疑为HDACs的检测提供更宽广的平台。

发明内容

本发明针对现有技术的不足，提供分子量较小，易于合成与修饰的一套HDACs核酸适配体。

为实现本发明的目的，是以HDAC1为例，所使用的技术方案为：

本发明的一套HDACs核酸适配体，所述的适配体为SEQ ID NO：1~5中所示的核苷酸序列中的任意一条或几条序列。

优选的，所述的适配体具有与SEQ ID NO：1~5所示的核苷酸序列中的任意一条或几条序列的同源性为60%以上的序列。

优选的，所述的适配体具有与SEQ ID NO：1~5所示的核苷酸序列中的任意一条或几条序列进行杂交的序列。

优选的，所述的适配体具有与SEQ ID NO：1~5所示的核苷酸序列中的任意一条或几条序列进行转录的序列。

优选的，所述的适配体序列上的若干个位置被磷酸化、甲基化、氨基化、巯基化或同位素化。

优选的，所述的适配体序列上结合有生物素、地高辛、荧光物质、纳米发光材料、聚乙二醇、肽段、蛋白、叶酸或酶标记。

优选的，所述的适配体具有与SEQ ID NO：1~5所示的核苷酸序列中的任意一条或几条序列改造成的相应的肽核酸。

本发明还提供一套HDACs核酸适配体在制备HDACs检测试剂盒或检测试剂纸的应用。

本发明突出的实质性特点和显著的进步是：

本发明核酸适配体利用蛋白SELEX技术筛选而得，分子量较小，易于合成与修饰，能够高特异性识别并且高亲和力结合HDACs，与其它蛋白不发生特性结合，无免疫原性，稳定易修饰，便于合成和保存，可用于检测HDACs，并且有效地预防及控制HDACs具有重要意义。用所述适配体制备的HDACs检测试剂盒和试剂纸对HDACs检测灵敏度高，且易于优化。

附图说明

图1是优化筛选文库的PCR退火温度的琼脂糖凝胶电泳。