[发明专利]一种富硒食用菌菌丝体的培养方法及其应用

权利要求书

1.一种富硒食用菌菌丝体的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)食用菌液体菌种的培养：将食用菌母种依次经过PDA培养基培养、摇瓶培养和发酵罐充气培养得到食用菌液体菌种；

(2)有机硒食用菌菌液的培养：制备无机硒培养基，并将所述步骤(1)中得到的部分食用菌液体菌种接种至无机硒培养基中进行培养，得到有机硒食用菌菌液；

(3)富硒原料的制备：将大豆、玉米和小麦的混合物使用所述步骤(2)中得到的有机硒食用菌菌液浸泡一定时间，然后晾干，得到富硒原料；

(4)富硒固体培养基的培养：将步骤(3)中制备的富硒原料中的大豆、玉米和小麦按一定比例混合灭菌、冷却后制备成富硒固体培养基，然后接种所述步骤(1)中的剩余食用菌液体菌种并进行培养，得到富硒食用菌菌丝体；

所述步骤(1)中，摇瓶培养的温度为20-25℃，培养时间为5-7d，每1000ml摇瓶培养基的原料包括：1-6g豆箔粉、20-60g白糖、0.5-1.5g酵母膏、0.5-1.5g磷酸二氢钾和0.5-1.5g硫酸镁；

所述步骤(1)中，发酵罐充气培养的温度为20-25℃，充气培养时间为4-6d，充气压强为0.01-0.03MPa，每1000ml发酵罐充气培养的培养基的原料包括：1-6g豆箔粉、20-60g白糖、0.5-3g硫酸镁、0.5-3g蛋白胨和0.5-3g磷酸二氢钾；

所述步骤(2)中，将食用菌液体菌种接种至无机硒培养基中进行充气培养，培养温度为20-25℃，培养时间为5-7d，充气压强为0.01-0.03MPa，每1000ml无机硒培养基的原料包括：1-6g豆箔粉、20-60g白糖、0.5-1.5g蛋白胨、0.5-1.5g磷酸二氢钾、0.5-1.5g硫酸镁和180-600mg无机硒；

所述步骤(3)中，加入的大豆、玉米、小麦与有机硒食用菌菌液形成的混合物的初始液体含量为38％-50％，并浸泡至混合物中的液体被完全吸收，浸泡温度为35-50℃，所述的大豆、玉米和小麦为粒径为4-8mm的颗粒；

所述食用菌为虫草菇、灰树花、姬松茸、黑皮鸡枞菌、羊肚菌、牛肝菌、秀珍菇、香菇、木耳、灵芝、牛樟芝菌中的一种；

所述步骤(1)中，PDA培养基培养的温度为20-25℃，培养时间为7-9d；所述PDA培养基的制备方法包括如下步骤：取马铃薯100-300g加入1000ml的水煮熟，然后过滤，得到滤液，将滤液依次加入10-30g葡萄糖、10-30g琼脂、0.2-1g硫酸镁、0.5-2g磷酸氢二钾、3-10g豆粕粉、3-10g蛋白胨和1-5g酵母粉，加热至溶解，并补水至1000ml，将得到的培养液在115-130℃温度下灭菌20-40min，然后冷却至20-30℃后即得到PDA培养基。

2.根据权利要求1所述的富硒食用菌菌丝体的培养方法，其特征在于：浸泡前，先将步骤(2)得到的有机硒食用菌菌液摇匀，使有机硒食用菌菌液中的食用菌菌丝体均匀分散在菌液中。

3.根据权利要求1所述的富硒食用菌菌丝体的培养方法，其特征在于：所述步骤(4)中，富硒固体培养基的原料按照质量百分比包括：3-7％大豆和20-30％小麦，余量为玉米。

4.根据权利要求1所述的富硒食用菌菌丝体的培养方法，其特征在于：所述步骤(4)的具体培养方法包括以下步骤：在百级净化培养房中，将接种的食用菌液体菌种先在20-25℃温度下，培养10-15d，然后在无菌条件下将富硒固体培养基表面生长的食用菌菌丝体搓散后，继续在20-25℃温度下，培养10-15d，再次在无菌条件下将富硒固体培养基表面生长的食用菌菌丝体搓散后，继续在20-25℃温度下，培养10-15d，得到富硒食用菌菌丝体。

5.一种富硒食用菌菌丝体的应用，其特征在于：使用如权利要求1-4中任一项富硒食用菌菌丝体的培养方法培养的食用菌菌丝体连同所述富硒固体培养基烘干后，粉碎成80-100目的细粉，得到富硒食用菌菌丝粉。