[发明专利]一种负载BMP-2的掺锶羟基磷灰石/丝素蛋白/肝素复合支架及其制备方法和应用有效
| 申请号: | 201810694134.6 | 申请日: | 2018-06-28 |
| 公开(公告)号: | CN108744061B | 公开(公告)日: | 2021-05-11 |
| 发明(设计)人: | 郭瑞;蓝咏;冯龙宝;朱麒宇;刘玉;李丹;毛宇 | 申请(专利权)人: | 广州贝奥吉因生物科技有限公司 |
| 主分类号: | A61L27/56 | 分类号: | A61L27/56;A61L27/54;A61L27/50;A61L27/46;A61L27/20 |
| 代理公司: | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人: | 宋静娜;郝传鑫 |
| 地址: | 510663 广东省广州市广州高新技*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 负载 bmp 羟基 磷灰石 丝素 蛋白 肝素 复合 支架 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种负载BMP-2的掺锶羟基磷灰石/丝素蛋白/肝素复合支架的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)在去离子水中加入掺锶羟基磷灰石,经超声分散得到掺锶羟基磷灰石分散液,所述掺锶羟基磷灰石中Sr/(Sr+Ca)的质量比为10%;
(2)将掺锶羟基磷灰石分散液与丝素蛋白溶液混合,冷冻干燥后将其浸泡于甲醇溶液中,烘干,得到掺锶羟基磷灰石/丝素蛋白支架;
(3)配制肝素溶液,将羟基磷灰石/丝素蛋白支架置于肝素溶液中进行温育,经清洗和冷冻干燥后,得到掺锶羟基磷灰石/丝素蛋白/肝素复合支架;
(4)将BMP-2负载到步骤(3)的掺锶羟基磷灰石/丝素蛋白/肝素复合支架上,获得所述负载BMP-2的掺锶羟基磷灰石/丝素蛋白/肝素复合支架。
2.根据权利要求1所述的负载BMP-2的掺锶羟基磷灰石/丝素蛋白/肝素复合支架的制备方法,其特征在于,所述丝素蛋白溶液的浓度为2~10 wt%。
3.根据权利要求1所述的负载BMP-2的掺锶羟基磷灰石/丝素蛋白/肝素复合支架的制备方法,其特征在于,所述掺锶羟基磷灰石为纳米掺锶羟基磷灰石,所述纳米掺锶羟基磷灰石采用共沉淀法制备得到。
4.根据权利要求1所述的负载BMP-2的掺锶羟基磷灰石/丝素蛋白/肝素复合支架的制备方法,其特征在于,所述步骤(1)中,掺锶羟基磷灰石分散液中掺锶羟基磷灰石与去离子水的比例为0.1 g:0.5~1.0 mL。
5.根据权利要求4所述的负载BMP-2的掺锶羟基磷灰石/丝素蛋白/肝素复合支架的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中,纳米掺锶羟基磷灰石分散液与丝素蛋白溶液的比为0.5~1.0 mL:10 mL。
6.根据权利要求1所述的负载BMP-2的掺锶羟基磷灰石/丝素蛋白/肝素复合支架的制备方法,其特征在于,所述肝素溶液的浓度为1~3 mg/mL。
7.根据权利要求1所述的负载BMP-2的掺锶羟基磷灰石/丝素蛋白/肝素复合支架的制备方法,其特征在于,所述BMP-2的浓度为0.005~0.015 mg/mL。
8.根据权利要求1所述的负载BMP-2的掺锶羟基磷灰石/丝素蛋白/肝素复合支架的制备方法,其特征在于,所述丝素蛋白溶液的制备方法为:
1)将蚕茧剪碎,然后加入温度为95~100℃,浓度为0.5 wt% NaHCO3水溶液中进行脱胶处理,其中,NaHCO3水溶液与蚕茧的比例为100 mL:2 g;脱胶后用去离子水清洗丝素至中性,再重复脱胶和洗涤操作一次,烘干,得到丝素蛋白;
2)取丝素蛋白置于圆底烧瓶中,加入浓度为9.0~9.5 mol/L的溴化锂溶液,丝素蛋白与溴化锂溶液的比例为1 g:12.5~25 mL,在40~60°C水浴加热溶解4~6小时,将丝素蛋白混合液置于透析袋中透析3~5天后,离心,取出上层清液置于浓度为10~25 wt%的聚乙二醇溶液中进行反透析8~24小时,即得所述丝素蛋白溶液。
9.根据权利要求1~8任一项所述方法制备得到的负载BMP-2的掺锶羟基磷灰石/丝素蛋白/肝素复合支架。
10.根据权利要求9所述的负载BMP-2的掺锶羟基磷灰石/丝素蛋白/肝素复合支架在制备骨修复材料中的应用。
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