[发明专利]去除并测定湿地植物根际微生物群落对植物吸收水中磷影响的实验方法

说明书

本发明公开了一种去除并测定湿地植物根际微生物群落对植物吸收水中磷影响的实验方法，涉及生物技术领域，该去除并测定湿地植物根际微生物群落对植物吸收水中磷影响的实验方法包括1.去除湿地植物根际微生物、2.植物培养液配制、3.去除根际微生物的植物培养对比实验三个步骤，通过比较几组培养液中磷浓度，得到二者之差即为湿地植物根际微生物群落对植物吸收水中磷的影响，可以客观可靠地研究各种根际微生物群落对植物吸收水中磷影响，为提高植物对磷吸收提供优良的技术指导。

技术领域

本发明涉及水环境生态修复领域，特别涉及一种去除并测定湿地植物根际微生物群落对植物吸收水中磷影响的实验方法。

背景技术

磷是植物生长所必须的元素之一，也是导致水体富营养化的限制性营养元素。湿地生态系统中有着复杂的物质转化和循环过程，对污染物的截留、吸附、吸收、降解等作用可有效地控制污染物进入河流、湖泊等水体。很多环保工作致力于利用湿地高效地去除磷污染，特别是在控制农业面源污染方面。湿地中的植物在吸收和去除磷方面起着重要作用。然而，环境中大部分形态的磷不能被植物直接吸收，只有经过分解转化成为有效磷，才能被植物吸收，湿地植物根际微生物在此过程中起着重要作用。然而现有研究并无将湿地根际微生物群落作为一个整体，研究其对水中磷的转化和对湿地植物吸收磷的影响。导致无法客观可靠地研究湿地根际微生物群落中各种微生物对植物吸收水中磷以及促进湿地对磷污染的去除的影响。

本发明为研究利用湿地根际微生物群落提高植物除磷效率提新的实验方法，以提高湿地植物除磷效果，为湿地防治水体富营养化、生态修复提供新方法和新思路。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种去除并测定湿地植物根际微生物群落对植物吸收水中磷影响的实验方法，可以客观可靠地研究各种湿地根际微生物群落对植物吸收水中磷影响，为提高湿地植物对磷吸收提供优良的技术指导。

为实现上述目的，本发明提供以下的技术方案：

该去除并测定湿地植物根际微生物群落对植物吸收水中磷影响的实验方法包括如下步骤：

(1)去除湿地植物根际微生物；

(2)植物培养液配制；

(3)去除根际微生物的植物培养对比实验。

优选的，所述去除湿地植物根际微生物包括如下步骤：

(1)采集天然湿地植物，实验前先用自来水初步将整株植物冲洗干净，根部不留土壤；

(2)用蒸馏水浸湿的棉球擦拭植物根和茎，直至棉球上没有褐色土壤痕迹为止，接着将植物根部浸泡在75％的酒精中10～15分钟(与酒精接触总时间不超过20分钟，以免伤害植物，影响后续培养实验)，在无菌操作台中，将浸泡过的植物从酒精中取出，迅速用无菌水冲洗掉残余酒精，在无菌环境中，用棉球沾取75％的酒精并继续全面仔细擦拭植物的根须3遍，擦过后立刻用无菌水冲洗或擦拭掉残余酒精，即得到根际微生物被去除的植株；

(3)为验证根际微生物是否被去除干净，取250mL锥形瓶，加入蒸馏水100mL，于121℃下高压灭菌锅中灭菌20分钟，冷却到室温，得到灭菌后的装有无菌水的锥形瓶，再将进行上述操作后的去除根际微生物的植株，取一株植物在无菌条件下，用灭菌过的剪刀或小刀剪下其根须2g，放入装有100mL无菌水的灭菌锥形瓶中，用灭菌棉塞或封口膜封口，放置在恒温震荡器上震荡30分钟后取出，取其中1mL震荡提取液，在无菌条件下，均匀涂布在已制备好的灭菌过的牛肉膏蛋白胨固体培养基上，然后放置在恒温培养箱中30℃下培养48小时后观察，如果没有菌落生长，则说明根际微生物已去除干净。

优选的，所述植物培养液配制包括如下步骤：