[发明专利]巨大芽孢杆菌及其菌剂制备及其土壤重金属修复应用

权利要求书

1.一种基于巨大芽孢杆菌(Bacillusmegaterium)NCT-5的应用，其特征在于，将其作用于次生盐碱化土壤以实现重金属污染土壤修复；

所述的重金属污染土壤是指：镉、铅、铜污染土壤中的总镉含量为小于或等于3.0 mg/kg、总铅含量为小于或等于1000 mg/kg、总铜含量为小于或等于300 mg/kg；

所述的巨大芽孢杆菌(Bacillusmegaterium)NCT-5，保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心(简称CGMCC)，保藏编号CGMCC NO.12910，保藏日期是2016年8月26日，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，邮编：100101，该巨大芽孢杆菌(Bacillusmegaterium)NCT-5经测得菌株16S rDNA大部分序列1476 bp，如SEQ ID No.1所示。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征是，具体通过将巨大芽孢杆菌(Bacillusmegaterium)NCT-5扩大培养得到固体制剂后施用于待修复土壤后，在土壤中种植蔬菜植物，菌剂通过硝酸盐代谢途径降低土壤中过量的硝酸盐，同时通过分泌有机酸等物质活化或螯合土壤中的重金属，促进修复植物对重金属的富集，从而达到修复土壤的目的。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征是，所述的扩大培养是指：将NCT-5菌株接种于含有碳源、氮源、无机盐和水的无菌发酵培养基中，在C/N比大于或等于5，初始pH为6.0~7.5、培养温度为20~37 °C的环境下培养8~24小时。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征是，所述的无菌发酵培养基的组分含量为：碳源2~20 g/L，氮源0.1~10 g/L，无机盐0.01~10g/L，其余为水，pH 6.0~7.5；其中碳源为葡萄糖、蔗糖、麸皮、玉米粉和糖蜜中的任意一种或几种的组合；氮源为豆饼粉、豆粕粉、棉籽饼粉、尿素、(NH₄)₂SO₄、KNO₃和NH₄NO₃中的任意一种或几种的组合；无机盐为硫酸盐、磷酸盐、磷酸二氢盐和碳酸盐中的一种或多种。

5.根据权利要求1所述的应用，其特征是，所述的固体制剂中含有巨大芽孢杆菌(Bacillusmegaterium)NCT-5的菌株形成的芽孢2亿个以上/克以及有机物料。

6.根据权利要求2所述的应用，其特征是，所述的施用包括：

1)针对次生盐渍化单一污染土壤，每亩土壤施用50 kg微生物固体制剂，1~3天后直接种植叶菜类、瓜果类、根茎类蔬菜；

2)针对镉、铅、铜单一或复合重金属污染土壤，每亩土壤施用45 kg微生物固体制剂，2~3天后采用间作方式种植龙葵和茄子或龙葵和辣椒，之后每隔30天施用15 kg微生物固体制剂；

3)针对次生盐渍化与镉、铅、铜中任一种或几种重金属的复合污染土壤，每亩土壤施用50 kg微生物固体制剂，2~3天后种植龙葵，30天后收割，再次施用40 kg微生物固体制剂，1天后种植茄子或辣椒，之后每隔30天施用15 kg微生物固体制剂，每亩土壤施用50 kg微生物固体制剂，1天后种植龙葵。