[发明专利]巨大芽孢杆菌及其菌剂制备及其节能减排应用

说明书

一种巨大芽孢杆菌及其菌剂制备和应用，涉及巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)NCT‑5CGMCC NO.12910，利用本发明菌株液体制剂和固体制剂联合施用可有效降低土壤硝酸盐含量以及降低N₂O排放。本发明制备简便，操作方便，处理成本低，可广泛应用于土壤修复领域。

技术领域

本发明涉及的是一种生物工程领域的技术，具体是一种巨大芽孢杆菌及其菌剂制备及其节能减排应用。

背景技术

目前国内外对减少农田土壤N₂O排放的主要措施是合理施用氮肥和施用硝化抑制剂。但如何合理施用氮肥是一个需要长期研究并结合田间有效管理的方法，不适用于大多数的分散式小规模农户；而施用硝化抑制剂则容易造成二次污染。次生盐渍化土壤的修复方法主要包括灌溉洗盐、施用土壤改良剂、种植耐盐植物等，尽管这些也能达到土壤修复的效果，但存在成本高、易造成二次污染、修复周期长等缺点。

发明内容

本发明针对现有技术存在的上述不足，提出一种巨大芽孢杆菌及其菌剂制备及其节能减排应用，不仅能有效降低土壤硝酸盐含量，并减少N₂O的排放，具有修复周期短、操作简便、无二次污染的优点。

本发明是通过以下技术方案实现的：

本发明涉及一种微生物菌株，即巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)NCT-5，目前该菌株保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心(简称CGMCC)，保藏编号CGMCCNO.12910，保藏日期是2016年8月26日，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，邮编：100101。

本发明涉及上述巨大芽孢杆菌NCT-5(CGMCC NO.12910)的实现方法，以巨大芽孢杆菌CGMCC NO.4698作为出发菌，经紫外光诱变和过硝酸盐转化率及氧化亚氮还原率筛选后经N+注入后得到。

所述的出发菌，即巨大芽孢杆菌(CGMCC NO.4698)保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心(简称CGMCC)，保藏编号CGMCC NO.4698，保藏日期是2011年3月21日。

所述的紫外光诱变是指：采用但不限于紫外灯对出发菌的菌悬液照射。

所述的筛选是指：将巨大芽孢杆菌(CGMCC NO.4698)作为出发菌，制备成菌悬液后涂布于含有NO₃-的平板上培养并挑取取单菌落转接至含有NO₃-的液体培养基中并注入氧化亚氮气体后再次培养，挑取其中硝酸盐转化率和氧化亚氮还原率符合要求的菌株。

所述的N⁺注入是指：将符合要求的菌株制备成菌悬液，采用78～234×10¹³N⁺/cm²注入剂量进行N⁺注入。

所述的筛选，优选将第一次筛选得到的菌株进行再次筛选。

本发明涉及一种基于上述巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)NCT-5的应用，将其作用于次生盐碱化土壤以同时实现土壤修复和温室气体减排。

所述的应用，具体通过将巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)NCT-5制备成微生物菌剂并施用于待修复土壤后，在土壤中种植蔬菜，菌剂通过硝酸盐代谢途径降低次生盐渍化土壤中的硝酸盐，同时将氧化亚氮气体还原为氮气，实现土壤修复和温室气体减排。

所述的微生物菌剂包括固体制剂和液体制剂，其中固体制剂包括巨大芽孢杆菌(Bacillusmegaterium)NCT-5的菌株形成的芽孢2亿个以上/克以及有机物料；液体制剂包括巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)NCT-5的菌株形成的芽孢2亿个以上/克以及保护剂。