[发明专利]基于CoOOH纳米片类过氧化物酶特性的As(V)双模式检测方法

权利要求书

1.基于CoOOH纳米片类过氧化物酶特性的As(V)的吸收光谱检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

将5μL 2.8mg/mL的CoOOH溶液加入到100μL的HEPES缓冲溶液中并混合均匀，再加入不同浓度的As(V)溶液，用超纯水稀释反应溶液的总体积至200μL，在摇床上剧烈震动反应120min，然后，向所得溶液中依次加入100μL醋酸-醋酸钠缓冲溶液、5μL 5mM的ABTS和5μL0.18M的H₂O₂，用超纯水稀释溶液总体积为500μL，在室温下反应30min后，通过紫外可见分光光度计测定溶液的吸收光谱，根据吸收峰强度与As(V)浓度之间的线性关系判断As(V)的含量；其中，所述HEPES缓冲溶液的浓度为100mM，pH值为7.5，所述醋酸-醋酸钠缓冲溶液的浓度为250mM，pH值为4.0。

2.基于CoOOH纳米片类过氧化物酶特性的As(V)的电化学检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

将CoOOH修饰玻碳电极浸泡在50μL含有不同浓度As(V)的HEPES缓冲溶液中，室温下反应120min，将以CoOOH纳米片修饰玻碳电极为工作电极而构成的三电极系统置于1.0mL含有50μM ABTS和1.8mM H₂O₂的醋酸-醋酸钠缓冲溶液中，采用电化学工作站施加150mV的电压，测量计时电流曲线，根据计时电流值的大小与As(V)浓度之间的线性关系判断As(V)的含量；其中，所述HEPES缓冲溶液的浓度为50mM，pH值为7.5，所述醋酸-醋酸钠缓冲溶液的浓度为50mM，pH值为4.0，含有0.1M KCl。

3.如权利要求2所述的基于CoOOH纳米片类过氧化物酶特性的As(V)的电化学检测方法，其特征在于，所述三电极系统是指以CoOOH纳米片修饰玻碳电极为工作电极、铂丝为对电极、Ag/AgCl电极为参比电极构建的三电极系统。

4.如权利要求2所述的基于CoOOH纳米片类过氧化物酶特性的As(V)的电化学检测方法，其特征在于，所述CoOOH纳米片修饰玻碳电极的制备方法包括如下步骤：

(1)CoOOH纳米片制备：将1mL 1.0M NaOH溶液与4mL 10mM CoCl₂溶液混合，剧烈磁力搅拌1min，再加入200μL 0.9M NaClO溶液，充分混匀后，在功率为500W的超声仪中超声20min，得到近黑色的溶液，在12000rpm离心转速下离心并采用超纯水反复清洗，直至所得溶液的pH为中性，将得到的CoOOH纳米片分散在1mL超纯水中，制成浓度为50μg/mL的CoOOH纳米片溶液，并于4℃储存；

(2)CoOOH纳米片修饰玻碳电极的制备：玻碳电极依次在粒径为1.0、0.3和0.05μm的Al₂O₃糊中抛光打磨至表面呈镜面，再依次将电极在乙醇和超纯水中超声2min，经高纯氮气吹干后，将10μL 50μg/mL步骤(1)制备的CoOOH溶液滴涂在经以上处理的电极表面，放置过夜使其干燥。