[发明专利]蛋白质翻译过程中直接实现脂肪酸修饰的表达系统及应用有效
| 申请号: | 201810546996.4 | 申请日: | 2018-05-31 |
| 公开(公告)号: | CN108823225B | 公开(公告)日: | 2020-01-14 |
| 发明(设计)人: | 王谦;郑峰;王磊 | 申请(专利权)人: | 中国科学院理化技术研究所杭州研究院 |
| 主分类号: | C12N15/63 | 分类号: | C12N15/63;C12N9/00;C12N15/52;C07K14/605 |
| 代理公司: | 33246 浙江千克知识产权代理有限公司 | 代理人: | 黎双华 |
| 地址: | 310000 浙江省杭*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 修饰 蛋白质脂肪酸 非天然氨基酸 脂肪酸修饰 表达宿主 表达系统 正交氨酰tRNA合成酶 胰高血糖素样肽 蛋白质翻译 三氟乙酸盐 终止密码子 翻译 产物分离 化学修饰 目标蛋白 生物活性 药物蛋白 遗传编码 脂肪酸类 庚酰基 赖氨酸 突变体 盐酸盐 均一 体外 琥珀 体内 局限 应用 | ||
1.在翻译过程中直接实现蛋白质脂肪酸修饰的表达系统,其特征在于包括:
(1)脂肪酸类非天然氨基酸ε-N-庚酰基赖氨酸HepoK的盐酸盐或三氟乙酸盐,其分子结构式如下:
(2)编码对HepoK特异的正交氨酰tRNA合成酶的质粒;所述正交氨酰tRNA合成酶为突变合成酶1,其氨基酸序列为:
MDKKPLNTLISATGLWMSRTGTIHKIKHHEVSRSKIYIEMACGDHLVVNNSRSSRTARALRHHKYRKTCKRCRVSDEDLNKFLTKANEDQTSVKVKVVSAPTRTKKAMPKSVARAPKPLENTEAAQAQPSGSKFSPAIPVSTQESVSVPASVSTSISSISTGATASALVKGNTNPITSMSAPVQASAPALTKSQTDRLEVLLNPKDEISLNSGKPFRELESELLSRRKKDLQQIYAEERENYLGKLEREITRFFVDRGFLEIKSPILIPLEYIERMGIDNDTELSKQIFRVDKNFCLRPMMAPNLANYARKLDRALPDPIKIFEIGPCYRKESDGKEHLEEFTMLNFFQMGSGCTRENLESIITDFLNHLGIDFKIVGDSCMVYGDTLDVMHGDLELSSAVVGPIPLDREWGIDKPWIGAGFGLERLLKVKHDFKNIKRAARSESYYNGISTNL;
(3)表达宿主。
2.如权利要求1所述的表达系统,其特征在于编码突变合成酶1的核苷酸序列为:
ATGGATAAAAAGCCTTTGAACACTCTGATTTCTGCGACCGGTCTGTGGATGTCCCGCACCGGCACCATCCACAAAATCAAACACCATGAAGTTAGCCGTTCCAAAATCTACATTGAAATGGCTTGCGGCGATCACCTGGTTGTCAACAACTCCCGTTCTTCTCGTACCGCTCGCGCACTGCGCCACCACAAATATCGCAAAACCTGCAAACGTTGCCGTGTTAGCGATGAGGACCTGAACAAATTCCTGACCAAAGCTAACGAGGATCAGACCTCCGTAAAAGTGAAGGTAGTAAGCGCTCCGACCCGTACTAAAAAGGCTATGCCAAAAAGCGTGGCCCGTGCCCCGAAACCTCTGGAAAACACCGAGGCGGCTCAGGCTCAACCATCCGGTTCTAAATTTTCTCCGGCGATCCCAGTGTCCACCCAAGAATCTGTTTCCGTACCAGCAAGCGTGTCTACCAGCATTAGCAGCATTTCTACCGGTGCTACCGCTTCTGCGCTGGTAAAAGGTAACACTAACCCGATTACTAGCATGTCTGCACCGGTACAGGCAAGCGCCCCAGCTCTGACTAAATCCCAGACGGACCGTCTGGAGGTGCTGCTGAACCCAAAGGATGAAATCTCTCTGAACAGCGGCAAGCCTTTCCGTGAGCTGGAAAGCGAGCTGCTGTCTCGTCGTAAAAAGGATCTGCAACAGATCTACGCTGAGGAACGCGAGAACTATCTGGGTAAGCTGGAGCGCGAAATTACTCGCTTCTTCGTGGATCGCGGTTTCCTGGAGATCAAATCTCCGATTCTGATTCCGCTGGAATACATTGAACGTATGGGCATCGATAATGATACCGAACTGTCTAAACAGATCTTCCGTGTGGATAAAAACTTCTGTCTGCGTCCGATGATGGCGCCGAACCTTGCTAACTATGCTCGTAAACTGGACCGTGCCCTGCCGGACCCGATCAAAATTTTCGAGATCGGTCCTTGCTACCGTAAAGAGTCCGACGGTAAAGAGCACCTGGAAGAATTCACCATGCTGAACTTCTTCCAGATGGGTAGCGGTTGCACGCGTGAAAACCTGGAATCCATTATCACCGACTTCCTGAATCACCTGGGTATCGATTTCAAAATTGTTGGTGACAGCTGTATGGTGTATGGCGATACGCTGGATGTTATGCACGGCGATCTGGAGCTGTCTTCCGCAGTAGTGGGCCCAATCCCGCTGGATCGTGAGTGGGGTATCGACAAACCTTGGATCGGTGCGGGTTTTGGTCTGGAGCGTCTGCTGAAAGTAAAACACGACTTCAAGAACATCAAACGTGCTGCACGTTCCGAGTCCTATTACAATGGTATTTCTACTAACCTGTAA。
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