[发明专利]生殖道病原体核酸检测引物、探针、试剂盒及检测方法有效
| 申请号： | 201810536557.5 | 申请日： | 2018-05-30 |
| 公开（公告）号： | CN108660254B | 公开（公告）日： | 2023-07-28 |
| 发明（设计）人： | 尹华立;裘惠良;郑银娜 | 申请（专利权）人： | 杭州千基生物科技有限公司;杭州美联医学股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/689;C12Q1/686;C12Q1/04;C12N15/11 |
| 代理公司： | 深圳市博锐专利事务所 44275 | 代理人： | 林栋 |
| 地址： | 311215 浙江省杭州市萧山*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 生殖 病原体 核酸 检测 引物 探针 试剂盒 方法 | ||
1.一种生殖道病原体核酸检测试剂盒，其特征在于，包括第一PCR反应液、第二PCR反应液、探针、量子点和固定探针的膜条；
所述第一PCR反应液包括核苷酸序列如SEQ ID No.1-6所示的检测生殖道病原体的引物以及核苷酸序列如SEQ ID No.17-18所示的内控引物；所述第二PCR反应液包括核苷酸序列如SEQ ID No.13-14的检测HPV分型的引物以及核苷酸序列如SEQ ID No.17-18所示的内控引物；
其中，下游引物5’端均用生物素进行标记；
所述探针包括：
检测生殖道病原体的探针，其核苷酸序列如SEQ ID No.21-34所示；
检测HPV分型的探针，其核苷酸序列如SEQ ID No.35-52所示；
内控探针，其核苷酸序列如SEQ ID No.53所示；
所述膜条的材质为尼龙。
2.根据权利要求1所述的生殖道病原体核酸检测试剂盒，其特征在于，所述探针的5’端进行氨基修饰。
3.根据权利要求1所述的生殖道病原体核酸检测试剂盒，其特征在于，所述第一PCR反应液的组分含量为：
水：12.7μL，
10×PCR buffer：2.5μL，
25mM MgCl2：1.5μL，
25mM dNUTP：0.2μL，
10μM核苷酸序列如SEQ ID No.1-4所示的引物各0.5μL，
10μM核苷酸序列如SEQ ID No.5-6所示的引物各0.4μL，
10μM内控引物各0.1μL，
5U/μL Taq酶：1.0μL，
1U/μL UNG酶：0.1μL；
所述第二PCR反应液的组分含量为：
水：14.5μL，
10×PCR buffer：2.5μL，
25mM MgCl2：1.5μL，
25mM dNUTP：0.2μL，
10μM检测HPV分型的引物各0.5μL，
10μM内控引物各0.1μL，
5U/μL Taq酶：1.0μL，
1U/μL UNG酶：0.1μL。
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