[发明专利]一种具有抑菌作用的五味子提取物的制备方法

说明书

本发明公开了一种具有抑菌作用的五味子提取物的制备方法，该方法包括五味子乙醇提取物的制备、五味子乙酸乙酯萃取部位的提取、分离纯化出五味子提取物。本发明方法制得的五味子抑菌活性部位及组分，具有明显的抑菌活性，对耐药菌也具有较强的抑菌活性，且制备工艺简单。

技术领域

本发明属于中药技术领域，具体涉及一种具有抑菌作用的五味子提取物的制备方法。

背景技术

细菌可引起局部化脓感染、心包炎、肺炎，导致较高的死亡率。抗生素的发现与使用使人类在治疗感染性疾病病人时拥有了强大武器。然而，抗生素的过度使用甚至滥用导致院内和院外的抗生素耐药菌日益增多。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus，MRSA)临床上表现出高死亡率和高致病率，治疗已经相当棘手。随着抗生素的滥用，细菌多药耐药现象日益严重，导致了β-内酰胺类、四环素类、大环内酯类、氨基糖苷类和氟喹诺酮类等常用抗生素不同程度的耐药。糖肽类抗生素万古霉素是临床治疗耐药细菌感染的“最后防线”，然而万古霉素的毒副作用以及已经出现了耐万古霉素金黄色葡萄球菌使得情况未见明朗。近年来研发的利奈唑胺和达托霉素等抗耐药细菌药物也相继发现耐药，使得抗耐药菌药物可能面临无药可用，开发有效的抗耐药菌感染的新药迫在眉睫。

中药在感染性疾病的治疗方面有着传统历史，我国的中草药资源为天然抗菌药物的开发提供了丰富来源。现代药理学研究表明，五味子具有一定的抑菌活性，对不同的耐药菌有不同程度的抑制作用，对耐药金黄色葡萄球菌具有较强的抑菌活性。五味子为木兰科植物五味子Schisandra chinensis(Turcz.)Baill.的干燥成熟果实，习称“北五味子”，是一味常用中药。其味酸、甘，性温。有收敛固涩、益气生津、补肾宁心之功效。多用于久咳、梦遗、久泻不止、月经不调、自汗、盗汗、心悸失眠、津伤口渴、内热消渴等症状。

目前对五味子的药理活性研究主要集中于小极性木脂素成分，对于五味子抑菌活性的有效部位并未明确。

发明内容

本发明的目的是克服上述不足之处，提供一种具有抑菌作用的五味子提取物的制备方法。

本发明的目的是通过以下方式实现的：

一种具有抑菌作用的五味子提取物的制备方法，该方法包括以下步骤：

1)取五味子药材，干燥后粉碎，采用乙醇提取得到提取液，提取液浓缩得到五味子醇提物浸膏；

2)取上述步骤1)中五味子醇提物浸膏，加纯化水混悬得到纯化水混悬液，将纯化水混悬液依次经石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取，收集乙酸乙酯萃取液，浓缩至干，得到乙酸乙酯萃取物；

3)取上述步骤2)中乙酸乙酯萃取物混悬于纯化水中，配制成上样液，上AB-8型大孔吸附树脂，上样速率为1-3mL·min^-1，静置吸附3h，用纯化水进行洗脱，洗脱流速为3-5mL·min^-1，收集水洗脱组分，浓缩至干，得到具有抑菌作用的五味子提取物。

步骤1)中干燥采用的温度为60℃-70℃，优选为65℃。

优选步骤1)中采用乙醇提取条件为：乙醇浓度70％-80％，提取时间2-3h，料液比为1：10，提取温度80℃提取次数为2-3次。最优选70％乙醇回流提取。该浓度的乙醇提取一方面提取极性物质，另一方面把脂溶性物质提取出来，特别有利于五味子成分的初步提取，经过预实验表明，70％的乙醇提取物具有最强的体外抑菌活性，要显著强于单独用无水乙醇、乙酸乙酯、石油醚以及水提取。并且，通过大量的创造性劳动筛选用70％的乙醇提取，提取时间2-3h，料液比为1：10，提取温度80℃提取次数为2-3次，得到的浸膏得率最高。