[发明专利]一种四倍体不结球白菜的培育方法

权利要求书

1.一种四倍体不结球白菜的培育方法，其特征在于：包括以下步骤：

步骤1，选择当年采收的饱满不结球白菜种子，按常规技术播种育苗；

步骤2，当幼苗子叶完全展开时，用氨磺灵混合水溶液早晚各点滴幼苗生长点，连续处理5次，以点滴蒸馏水作为对照；

步骤3，成株后，先进行形态学鉴定，取疑似株第5～10片真叶的下表皮，进行气孔鉴定，选择气孔显著变大的植株作为四倍体变异初选植株；

步骤4，进入开花期，取四倍体变异初选植株进行花粉鉴定，进一步筛选获得花粉显著增大变形的植株作为四倍体变异疑似株；

步骤5，取四倍体变异疑似株嫩叶进行核DNA含量流式细胞光度分析，最终确认获得四倍体植株；

所述氨磺灵混合水溶液是氨磺灵、吐温 80和有机硅表面活性剂Silwet L-77的混合水溶液，氨磺灵的浓度为0.08-0.10mmol·L^-1，吐温 80的浓度为0.02% v/v，有机硅表面活性剂Silwet L-77的浓度为0.02% v/v。

2.根据权利要求1所述的四倍体不结球白菜的培育方法，其特征在于：所述氨磺灵混合水溶液的配置过程如下：采用15mL乙醇溶解氨磺灵，将溶液滴加入蒸馏水中，滴加过程中不断摇匀蒸馏水，保证无药剂析出，制得浓度为0.08-0.10mmol·L^-1的氨磺灵水溶液，再加入吐温 80和Silwet L-77，摇匀，即得。

3.根据权利要求1所述的四倍体不结球白菜的培育方法，其特征在于：步骤3中形态学鉴定，以叶片长度与宽度、叶面是否扭曲、茎粗、株高、冠幅为指标进行筛选鉴定。

4.根据权利要求1所述的四倍体不结球白菜的培育方法，其特征在于：步骤3中进行气孔鉴定的过程如下：显微镜下测定气孔的长和宽，并依据椭圆周长公式，计算气孔的周长，每一植株测定30-50个气孔；采用统计学T检验方法测定该植株气孔周长与对照植株气孔是否存在差异，其中气孔极显著大于对照的植株为四倍体初选变异植株。

5.根据权利要求1所述的四倍体不结球白菜的培育方法，其特征在于：步骤4中进行花粉鉴定的过程如下：显微镜下比较花粉粒的大小和形状，测定该植株花粉粒形状与对照植株花粉粒是否存在差异，其中花粉粒呈现出明显的不同于二倍体植株的不规则状为四倍体初选变异疑似株。