[发明专利]一种检测叶酸代谢相关基因遗传信息的方法及试剂盒

权利要求书

1.巢式PCR引物组在制备同时检测3个与叶酸代谢相关的基因多态性位点的试剂盒中的应用，其特征在于，

所述巢式PCR的引物组由引物对1、2、3、4、5、6组成，其中引物对1、3、5为外引物对，引物对2、4、6为内引物对；

或者所述巢式PCR的引物组由引物对1、2、3、4、7、8组成，其中引物对1、3、7为外引物对，引物对2、4、8为内引物对；

上述所有引物对的具体序列如下：

引物对1：

F1：TTGAACAGGTGGAGGCCAGCCT，

R1：ACTGAGTGAGAACCTCCAGGGGTG；

引物对2：

F2：CTGACTGTCATCCCTATTGG，

R2：GACCTGGAGATCCACTTTTTG；

引物对3：

F3：ACATCTTTGTTCTTGGGAGCGGG，

R3：AGGATGCCCTGGCGGTTCAC；

引物对4：

F4：CTAATACGACTGACTATAGGGAGAGGGGAGGAGCTGACCAGTGAAT，

R4：TCATCGTTCCAGGGCAGGCAAGT；

引物对5：

F5：GGAGCTTGTCTACAGGGTTGCACTT，

R5：ACGGCTCTAACCTTATCGGATTCACTA；

引物对6：

F6：AAGCGGTCTTCGCATTTACGGTTTCTTAAAGATTGAGGGAGAATCAA，

R6：TGTGGACCGATGGGCTTACCTGTACCACAGCTTGCTGACT；

引物对7：

F7：CTGTTGTGAATGATACTGTGGCT，

R7：CACAAAAGAATCTAGGCGGTC；

引物对8：

F8：CCCACGAGGAGCCTTAAAGATTGAGGGAGAATCAA，

R8：AGCTCGTTTAGTGAACCGTCAGATCGAAATCCATGTACCACAGCTTGCTGACT；

利用限制性核酸内切酶HinfI对巢式PCR产物进行酶切；

所述的3个与叶酸代谢相关的基因多态性位点分别为MTHFR基因的rs1801133位点、rs1801131位点及MTRR基因的rs1801394位点。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述同时检测3个与叶酸代谢相关的基因多态性位点的方法包含以下步骤：

1)将样品通过巢式PCR扩增靶位点；

2)利用限制性核酸内切酶HinfI对巢式PCR产物进行酶切；

3)将酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳，根据电泳图谱的特征条带确定3个基因多态性位点的基因型。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的样品为细胞样品或提取的DNA样品。

4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述巢式PCR的操作为：先用外引物对1、3、5进行第1轮PCR扩增，将扩增产物再用内引物对2、4、6进行第2轮PCR扩增；

或者所述巢式PCR的操作为：先用外引物对1、3、7进行第1轮PCR扩增，将扩增产物再用内引物对2、4、8进行第2轮PCR扩增。