[发明专利]与德高CR117大白菜抗根肿病性状连锁的Indel分子标记P29、试剂盒及其应用有效
| 申请号： | 201810353781.0 | 申请日： | 2018-04-19 |
| 公开（公告）号： | CN108285929B | 公开（公告）日： | 2020-07-14 |
| 发明（设计）人： | 司朝光;张清霞;苗在京;张淑霞;杨晓云;王殿纯;展恩军;孙吉禄;宋莹 | 申请（专利权）人： | 青岛市农业科学研究院 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人： | 刘奇 |
| 地址： | 266000 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | cr117 大白菜 根肿病 性状 连锁 indel 分子 标记 p29 试剂盒 及其 应用 | ||
1.与德高CR117大白菜抗根肿病性状紧密连锁的Indel分子标记P29，其特征在于，所述Indel分子标记P29的核苷酸序列为如序列表中SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。
2.一种用于扩增权利要求1所述的Indel分子标记P29的引物对，包括正向引物和反向引物，其特征在于，所述正向引物的核苷酸序列为如序列表中SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列；所述反向引物的核苷酸序列为如序列表中SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列。
3.一种用于筛选德高CR117大白菜抗根肿病性状的试剂盒，其特征在于，包括权利要求2所述的引物对。
4.权利要求1所述的Indel分子标记P29、权利要求2所述的引物对或权利要求3所述的试剂盒在筛选具有抗根肿病性状的德高CR117大白菜中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述筛选的方法，包括以下步骤：
(1)用权利要求2所述的引物对对待筛选德高CR117大白菜品种样本进行PCR扩增，得到的PCR产物；
(2)将所述PCR产物进行SDS-PAGE凝胶电泳，产生74bp的电泳条带的样本判断为具有抗德高CR117大白菜根肿病性状的材料。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述步骤(1)中PCR扩增的反应程序为：94℃预变性5min，94℃预变性45s，54℃退火30s，72℃延伸45s，35个循环，72℃延伸10min。
7.根据权利要求5或6所述的应用，其特征在于，所述步骤(1)中PCR扩增的反应体系如下：
8.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述步骤(2)中SDS-PAGE凝胶的浓度为6％～8％。
9.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述具有抗根肿病性状的德高CR117大白菜品种还包括自交株。
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