[发明专利]一种杉木组培苗瓶内生根方法

说明书

本发明提供一种杉木组培苗瓶内生根的方法，具体是：在增殖阶段通过高浓度和低浓度激素培养基交替处理，使丛生芽生长健壮，增殖系数稳定；从杉木丛生芽中选取生长健壮，长为3.0‑4.0cm丛生芽作为杉木组培接种芽苗；将选出的杉木组培芽苗接种到根原基诱导培养基中，暗培养3‑5天；暗培养后，移到LED红光和蓝光复合光源下每天培养14小时，培养15‑20天；将LED复合光源处理的杉木组培苗移入大棚，在室温下炼苗15‑25天，即可完成杉木组培苗瓶内生根。该方法使杉木组培瓶苗移栽前生根率平均达91.4％，生根时间为40‑45天，且杉木组培苗基部无愈伤，便于移栽成活。

技术领域

本发明涉及植株组织培养技术领域，尤其是一种杉木组培苗瓶内生根方法。

技术背景

杉木(Cunninghamia lanceolata)为杉科(Taxodiaceae)杉木属(Cunninghamia)植物。由于杉木是异花授粉树种，用种子繁殖，个体分化大，难以保持杉木母本的性状。采用组织培养方法，既可以保持母体的优良性状，又可以规模生产。

目前关于杉木组培苗瓶内生根主要采用两种方法：第一，调整基本培养基和生长调节剂，诱导杉木组培苗生根；第二，采用LED作为新的光源来促进杉木组培苗生根。

中国专利CN101480166A公布了一种杉木组织培养生根方法，切取杉木增殖继代小苗接种于生根培养基进行生根培养，生根培养基为改良MS培养基，并添加有0.4-0.8mg/LABT、0.1-0.5mg/L IBA、2-6mg/L根太阳稀释液等激素成分。经22天培养后，杉木组培苗最高生根率达到96％。但未公布平均生根率，且部分苗木出现烧苗、白苗现象，难以应用到工厂化生产。

中国专利CN103229723A公布了一种杉木组培苗生根诱导方法，切取增殖继代小苗，接种于预生根培养基中培养，经15-25天预生根培养后，再进行生根培养。此种方法的杉木组培苗的生根率最高可达96％。但预生根培养增加了生产工序，生根时间较长。

中国专利CN102726299A公布了基于LED光源的杉木二步法组培快繁方法，采用光强可调的红光和蓝光LED组合光源分阶段分步处理，即先使用单色红光作为杉木继代培养光源，继而再使用单色蓝光作为生根培养光源。此方法可在一定程度上提高杉木苗的生长速度和苗木健壮度，缩短生长周期和生根时间。但该方法未公布具体的生根时间、平均生根率等生根数据。

发明内容

本发明针对上述技术存在的不足，提出一种经过根原基诱导培养基(用于根原基的形成)、LED复合光源(用于根尖的伸长)和室温炼苗(将根的生长和炼苗在同一阶段实施)等三个步骤。分步实施杉木组培苗瓶内生根方法，从根本上解决了杉木组培过程生根难的问题，同时降低生产成本，可实现杉木组培苗工厂化育苗。

本发明具体包括以下步骤：

(1)杉木组培苗预处理：在增殖阶段通过高浓度和低浓度激素培养基交替处理各30天，即第T次扩增用高浓度激素，第T+1次扩增就用低浓度激，从而得到健壮的无菌杉木丛生芽苗；

(2)选苗：从增殖培养的无菌杉木丛生芽苗中选取生长健壮、长为3.0-4.0cm丛生芽作为杉木组培芽苗，切除组培苗基部叶片2-3片；

(3)根原基的形成：将健壮的杉木组培苗接种到根原基诱导培养基中，23-26℃暗培养3-5天，以诱导杉木组培苗根原基的形成；

(4)根尖的伸长：暗培养后，移到LED复合光源下每天照射14小时；复合光源每天照射14小时后继续暗培养10小时；该阶段温培养温度为23-26℃，培养时间为15-25天；

(5)根的生长与炼苗：将根尖伸长阶段处理后的杉木组培苗移入大棚，在室温下炼苗10-25天，即完成了杉木组培苗瓶内生根。