[发明专利]一种包虫病中间宿主病变脏器的快速检测方法

说明书

本发明提供了一种包虫病中间宿主病变脏器的快速检测方法，即通过重组蛋白抗原表达、制备特异性的多抗，制备胶体金试纸条。采用胶体金试纸条，可方便快捷地获得检测结果，可用于包虫病防控工作中牛羊包虫病患病情况检查。

技术领域

本发明涉及疾病预防控制领域，具体涉及一种包虫病中间宿主病变脏器的快速检测方法。

背景技术

我国包虫病流行区最主要的中间宿主是牛、羊等牲畜，牛羊包虫病感染率能够反映当地包虫病流行水平，是衡量当地包虫病流行情况的一项重要参数，是包虫病防控工作的一个重要指标。

国内外牛羊包虫病检测手段主要包括剖检触摸法、PCR鉴定法。目前国内普遍采用现场剖检触摸、在实验室对疑似病灶进行PCR鉴定及两种方法结合的方法进行牛羊包虫病检测。剖检触摸法完全依赖相关专业人员的经验，且误差较大；PCR方法又需要运至相关实验室进行鉴定，存在运输不便等缺点，两种方法相结合则存在等待检测结果时间长等缺点。总之，现有的主要方法存在着对技术人员要求高、不便于基层使用、结果不够准确、反馈结果不及时等缺点。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种包虫病中间宿主病变脏器的快速检测方法，即通过重组蛋白抗原表达、制备特异性的多抗，制备胶体金试纸条。采用胶体金试纸条，可方便快捷地获得检测结果，可用于包虫病防控工作中牛羊包虫病患病情况检查，可及时地得到检查结果，解决PCR鉴定法必须运到实验室进行检测的问题；根据抗原抗体反应检查疑似病灶中的囊液，结果准确，解决现场工作中触摸法不够准确和人员经验依赖性的问题；采用胶体金试纸条法，操作简单，便于基层专业力量薄弱地区使用，携带方便，解决实验条件要求高、结果反馈不及时的问题；稳定性好，可长期保存。

本发明的一方面，提供了一种快速检测包虫病中间宿主病变脏器的胶体金试纸，其特征在于，通过胶体金颗粒制备、确定抗体最适标记量、金标抗体制备纯化、处理液选择、确定喷涂量、组装制备而成的。

进一步，所述抗体为利用抗原抗体反应原理制备特异性的抗体。

进一步，所述抗原为从已有的包虫病病灶中提取囊液，进而提取特异性抗原，根据其序列进行重组蛋白抗原表达。

本发明的另一方面，提供了一种包虫病中间宿主病变脏器的快速检测方法，其特征在于，通过以下步骤完成：另取适量包虫病病灶，取适量囊液，滴在胶体金试纸的加样垫上，现场检测牛羊内脏，显示结果。

本发明的优点在于可解决现场触摸法准确性差、实验室检测不及时和要求高的问题。操作简便，无经验的人稍加示范即可使用，适合现场大规模应用。对标本既能成批检测，又可单份检测，结果显示快。及时了解牛羊感染情况，为包虫病防控策略制定和调整提供数据资料。试剂稳定，可长期储存；结果准确，不许实验室检测；操作简便，非专业人员略做示范亦可使用，适合技术力量薄弱的地区进行现场工作。

具体实施例

下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。

实施例1：胶体金试纸条的制备

1、重组蛋白抗原表达。从已有的包虫病病灶中提取囊液，进而提取特异性抗原，根据其序列进行重组蛋白抗原表达。

2、制备特异性的多抗。利用抗原抗体反应原理制备特异性的抗体。

3、制备胶体金试纸条。通过胶体金颗粒制备、确定抗体最适标记量、金标抗体制备纯化、处理液选择、确定喷涂量、组装，制备简便、快捷的试纸条。

4、检测。另取适量包虫病病灶，取适量囊液，滴在加样垫，现场检测牛羊内脏；

结果显示。10min-15min显示结果，为牛羊内脏检测及后续处理提供依据。

以上所述，仅为本发明专利较佳的实施例，但本发明专利的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明专利所公开的范围内，根据本发明专利的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都属于本发明专利的保护范围。