[发明专利]一种酪氨酸酶活性抑制剂及其应用

说明书

本发明属于生物领域，具体涉及生物酶，涉及一种酪氨酸酶活性的抑制剂，以及该抑制剂在抑制酪氨酸酶活性方面的应用。本发明所提供的具有酪氨酸酶抑制活性的化合物可应用于制备抗果蔬酶促褐变抑制剂、化妆品美白剂以及其他需要抑制酪氨酸酶活性的病症的药物中，可以作为活性成分，不加或加入食品添加剂辅料、化妆品辅料或药剂上接受的辅料，按照相应剂型的制备方法制成食品或保健品，也可以用于果蔬保鲜液。

技术领域：

本发明属于生物领域，涉及酪氨酸酶酶活性的控制，具体涉及一种酪氨酸酶活性抑制剂及其应用。

背景技术：

酪氨酸酶（Tyrosinase，EC 1.14.18.1）是一种75kD含铜酶，来源于胚胎神经鞘细胞，是黑色素代谢和儿茶酚胺的关键酶。Spritz等人证实TYR是一种铜结合蛋白，有铜A和铜B位点。离子铜特异性能与人TYR结合，一个位点的铜结合可以促进另一个位点的铜结合。组氨酸在铜B位点协调其结合。酪氨酸酶是生物体黑色素合成的关键酶，兼有加氧酶和氧化酶的双重功能，它能够把单酚催化成二酚，并把二酚氧化成醌；醌在非酶促条件下形成最终的反应产物黑色素。酪氨酸酶抑制剂就是通过抑制酪氨酸酶活性从而抑制黑色素生成。对于人体健康而言，酪氨酸酶的异常过量表达可导致人体的色素沉着性疾病；对于果树加工而言，由酪氨酸酶引起的酶促褐变不仅影响产品的色泽、外观，而且会破坏必需产品的氨基酸、降低其营养和消化吸收，并最终严重影响产品的营养价值和市场价值。在医药领域，酪氨酸酶抑制剂就是通过抑制酪氨酸酶活性从而抑制黑色素生成，因此酪氨酸酶抑制剂通过破坏酪氨酸酶活性，从而达到减少皮肤中黑色素的目的，进而用于治疗目前常见的色素沉着疾病如雀斑、黄褐斑、老年斑和黑色素瘤等，可广泛应用于医药和化妆品行业。在果蔬保藏领域，通过抑制酪氨酸酶的活性可以有效地减少果蔬褐变，提高果蔬的保藏品质。

辣木为辣木科辣木属植物，原产于印度北部喜马拉雅区域，辣木不仅可以食用，在热带、亚热带地区还用作植物药材而备受重视。近年来，辣木在我国广东、云南和海南等 都有引种栽培，其产品的开发成为热点，现有研究表明，长期服用辣木籽可以有效地起到抗衰老的作用。然而，尚未有研究将辣木叶提取物用于抑制酪氨酸酶的活性。

发明内容:

基于现有技术发展进程的缓慢和不足，本发明旨在提供一种酪氨酸酶活性的抑制剂，以及该抑制剂在抑制酪氨酸酶活性方面的应用，本发明采用天然的辣木叶为原料，经自然友好的方法提取获得了具有良好的酪氨酸酶抑制活性的抑制剂，以及该抑制剂在抑制酪氨酸酶活性中的应用。

为了解决以上技术问题，本发明采用如下技术手段：

本发明首先请求保护辣木叶提取物在抑制酪氨酸酶活性中的应用。

本发明还涉及一种酪氨酸酶活性抑制剂，所述酪氨酸酶活性抑制剂是以辣木叶为原料经提取制备而成，所述酪氨酸酶活性抑制剂经由以下步骤制备而成：步骤一，称取适量的干燥辣木叶，将其粉碎至250-300目，得到辣木叶粉末；步骤二，将粉碎好的辣木叶粉末与水按照质量比3：7-8混合，搅拌均匀，而后加入辣木叶粉末质量0.2-0.3倍量的氢氧化钠，搅拌混匀后，将混合物在50-55℃下加热20-25min，得到碱处理的混合物；步骤三，向步骤二制得的碱处理的混合物加入盐酸溶液，调节pH至6.8-7.2，而后进行离心分离，12000rpm离心处理10min，分别得到上清液和沉淀，收集上清液；步骤四，向步骤三得到的沉淀干燥，用15倍质量的乙醇于65-68℃下回流提取2次，每次3小时，收集并合并提取液；步骤五，将步骤四制得的提取液与步骤三离心分离得到的上清液混合，真空冷冻干燥，即得到所述的酪氨酸酶活性抑制剂。