[发明专利]一种霍山石斛多糖的制备方法

说明书

本发明公开了一种霍山石斛多糖的制备方法，包括如下步骤：1）粉碎；2）打浆；3）提取；4）醇沉；5）脱色处理；6）酶解；7）再次醇沉；8)过滤；9)第三次醇沉；(10离心分离；(11)冷冻干燥，即制得霍山石斛多糖纯品。本发明的原料经过冻干、超微粉碎，能够促使有效成分迅速溶出，提取步骤中加入大量的水高温提取有利于有效成分充分提取，本发明提供的制备方法获得的霍山石斛多糖制品提取率高、纯度高，同时具有优异的药物活性，在应用上具有突出的优势。

技术领域

本发明涉及一种中草药药物有效成分的提取方法，尤其是涉及一种霍山石斛多糖的制备方法。

背景技术

石斛属(Dendrobium)植物集观赏和药用价值为一体，为兰科中第二大属，全球约存在1400余种，广泛分布于亚洲、欧洲及大洋洲等热带及亚热带地

区，其中我国约有800多种，主要分布于西南、华东及华南地区。在我国传统医学理论中，多种石斛属植物的新鲜或干燥茎被收作药用，统称石斛(herbadendrobe)。石斛为常用贵重药材，它具有滋阴清热、益胃生津、润肺止咳等功效。几十年来，中外学者对石斛属植物的化学成分和药理作用进行了大量研究，发现石斛属植物化学成分多种多样，其主要有效成分为石斛类多糖。近年来，对于石斛多糖的研究逐渐引起人们的重视研究发现其在降血糖方向有着突出的效果。目前对于石斛多糖的结构分析、功能作用和分离提取等方面，申请号为201410010334.7中国专利涉及一种霍山石斛多糖的提取方法，包括以下步骤：a、浸泡：将新鲜霍山石斛，切碎，置于-25℃～-20℃冷冻6～8小时，常温下解冻后，用8～20倍重量的有机溶剂进行浸泡，去除浸泡液，得药渣；b、碱液提取：将所述药渣按固液重量比为1:10～40加入重量含量为0.5％～1％的碱溶液进行提取，得提取液；c、浓缩：将提取液浓缩至原体积的1/2，得浓缩液；d、将所述浓缩液调节pH值至9～11，静置，过滤，得过滤液Ⅰ；e、将所述过滤液Ⅰ加入活性炭，过滤，得过滤液Ⅱ，干燥，即得。申请号为201110365323.7 的中国专利公开了一种石斛多糖的分离纯化方法，其工艺步骤是：原料→粉碎→过筛→脱脂→微波辅助溶剂萃取→酶提→过滤→水提→抽滤→真空浓缩→醇沉→离心分离→冷冻干燥→粗品→除蛋白→冷冻干燥→石斛多糖，该发明的技术效果是：提高了石斛多糖提取率，缩短提取时间、减少能耗、有效保存石斛多糖生物活性。但是提取制备的方法过于单一，不能满足高精度、高 提取率的多糖提取的要求，一方面，多糖的提取过程会有不同种类的杂质混入，另一方面，多糖也是相对复杂的结构和构型，这些就是现有提取方式依然没有达到理想提取效果的原因。但是这些研究工作为后面进一步地深入研究和产业化应用奠定了一定的基础。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种石斛多糖的制备方法，达到了高效、快速、绿色的提取石斛多糖的目的。

为达到上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种霍山石斛多糖的制备方法，包括如下步骤：

1)粉碎：取霍山石斛清洗、冷冻干燥、粉碎、超微粉碎；

2)打浆：将步骤1)所得粉末依次分别加入丙酮、乙醇中0-10℃打浆处理，加入的丙酮、乙醇与所述粉末的料液比均为为1-2g/5ml；静置沉淀、过滤分离沉淀与上清液；

3)提取：向步骤2)所得沉淀中加入50-80倍重量份的热水，超声提取；提取结束后，过滤去除石斛残渣，收集滤液，真空浓缩后，获得霍山石斛多糖浸膏，水温50-80℃；

4)醇沉：将步骤2)所得浸膏加入到20-30倍重量份的乙醇中，打浆处理，静置得沉淀，所述乙醇为80-90％(v/v)；

5)脱色处理：将步骤4)的溶液浓缩，加去离子水复溶后以活性炭脱色处理；

6)酶解：将步骤5)脱色处理后的提取液，加入蛋白酶用泵输送通过填充有蛋白酶的固定化酶反应器，进行酶促水解反应，反应结束后获得提取物的酶解液；