[发明专利]一种痰液液化试剂、含有其的试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种痰液液化试剂，其特征在于，包括固定剂、液化液、玻璃珠、核酸外切酶缓冲液；所述固定剂中含有溶剂和聚合物，所述聚合物为聚天冬氨酸钠或聚-L-谷氨酸；所述液化液中含有还原剂和pH值为7.0～8.5的缓冲溶液，所述还原剂为二硫苏糖醇、三(2-羧乙基)膦盐酸盐、二硫赤藓糖醇中的一种。

2.根据权利要求1所述的痰液液化试剂，其特征在于，所述固定剂中的溶剂为体积浓度40～60％的乙醇溶液，聚天冬氨酸在所述溶剂中的浓度为10～1000μmol/L，聚天冬氨酸钠的分子量为2000～50000；所述聚-L-谷氨酸在所述溶剂中的浓度为100～1000μmol/L，分子量为5000～150万。

3.根据权利要求1所述的痰液液化试剂，其特征在于，所述液化液中含有还原剂和pH值为7.6～8.0的缓冲溶液，所述缓冲溶液为磷酸盐或NaHCO₃缓冲溶液；所述还原剂选自0.05～0.2g/100mL的二硫苏糖醇、摩尔浓度5-200mmol/L的三(2-羧乙基)膦盐酸盐、0.05～0.2g/100mL的二硫赤藓糖醇中的一种。

4.根据权利要求1所述的痰液液化试剂，其特征在于，所述玻璃珠的直径为1～5mm。

5.根据权利要求1所述的痰液液化试剂，其特征在于，每毫升核酸外切酶缓冲液中含有0～20单位的核酸外切酶，所述核酸外切酶为recombinant DNase I。

6.根据权利要求1～5任一项所述的痰液液化试剂，其特征在于，包括体积份的固定剂1～3份、液化液1～3份、玻璃珠2～6份、核酸外切酶缓冲液3～8份。

7.一种痰液液化试剂盒，其特征在于，包括权利要求1～6任一项所述的痰液液化试剂，以及无菌过滤网，所述无菌过滤网的孔径为40～100μm。

8.权利要求1～6任一项所述的痰液液化试剂或权利要求7所述痰液液化试剂盒在痰液液化中的应用。

9.应用权利要求1～6任一项所述的痰液液化试剂进行痰液液化的方法，其特征在于，包括操作：

1)将体积为固定剂0.8～1.2倍的痰液转移至容器内，加入固定液及液化剂，再加入玻璃珠，液化15～30分钟；

2)加入核酸外切酶缓冲液，观察容器壁上无蛋白纤维丝粘附及液化液中无团块存在，用过滤网过滤。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，步骤1)液化所用仪器为垂直旋转混合仪，垂直转速为10～50r/min；

步骤2)加入核酸外切酶缓冲液后，25～37℃放置15～30min。