[发明专利]一种细胞裂解试剂及方法

说明书

本发明公开了一种细胞裂解试剂及方法。针对现有技术运输成本高、操作耗时、不灵活的缺陷，本发明提供的细胞裂解试剂及方法能使细胞在常温条件下快速裂解，裂解过程无需加热处理，省时简便；并且细胞裂解产物中DNA稳定性好，可运输或储存后再进行全基因组扩增，无需裂解后立刻进行扩增，操作灵活；整个流程无需涉及干冰运输，大大节约了运输成本。本发明试剂和方法具有运输成本低廉、操作简便、高效、灵活、细胞裂解产物DNA保存度高的优势，特别适用于少量细胞的全基因组扩增过程。

技术领域

本发明属于单细胞全基因组扩增领域，更具体地涉及一种细胞裂解试剂及方法。

背景技术

胚胎植入前遗传学筛查(Preimplantation Genetic Screening，PGS)是指胚胎植入着床之前，对早期胚胎进行染色体数目和结构异常的检测，通过一次性检测胚胎23对染色体的结构和数目，分析胚胎是否有遗传物质异常。现有的PGS筛查方式有荧光原位杂交技术(FISH)、比较基因组杂交技术(CGH)、微阵列比较基因组杂交技术、单核苷酸多态性微阵列技术等技术，但是这些技术存在同一时间内仅能检测到少数的染色体、耗时长、操作繁琐、仪器成本高等缺点。为了对现有技术有效补充和完善，利用全基因组扩增对少量细胞(如活检细胞)的遗传信息进行扩增，随后进行测序的方法应运而生。

全基因组扩增前需要对活检细胞进行裂解，传统的方法是将活检细胞低温或干冰运输到检测点，利用蛋白酶K在50℃下裂解活检细胞至少1小时，裂解结束后需要尽快进行全基因组扩增。传统方法存在以下弊端：①活检细胞需低温或干冰运输，运输成本高；②细胞裂解需在特定温度下进行，需要配备保温装置，增加操作成本；③裂解结束后需要尽快对裂解产物进行全基因组扩增，不能灵活安排实验进程。基于现有问题，开发一种灵活、高效的细胞裂解方法及配套试剂，解决对少量细胞进行全基因组扩增的问题，具有重要的现实意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种细胞裂解试剂，利用细胞裂解试剂进行细胞裂解的方法，及利用细胞裂解物进行全基因组扩增的方法。

本发明所采取的技术方案是：

一种细胞裂解试剂，所述细胞裂解试剂包括Tris-HCl、EDTA、SDS、NP-40、无核酸酶水。

所述细胞裂解试剂包括如下终浓度的溶质：Tris-HCl(5～15)mmol/L、EDTA(0.5～1.5)mmol/L、SDS(5～15)g/L、NP-40(0.1～1)g/L，溶剂为无核酸酶水；

优选地，所述细胞裂解试剂包括如下终浓度的溶质：Tris-HCl(8～12)mmol/L、EDTA(0.8～1.2)mmol/L、SDS(8～12)g/L、NP-40(0.4～0.6)g/L，溶剂为无核酸酶水。

进一步的，所述细胞裂解试剂还包括还原型谷胱甘肽。

还原型谷胱甘肽终浓度为(0.5～1.5)mol/L，更优选地，还原型谷胱甘肽终浓度为(0.9～1.1)mol/L。

优选的，所述细胞裂解试剂的pH为7.8～8.3。

一种细胞裂解方法，包括：将待测细胞与上述细胞裂解试剂混匀，常温静置至少8min。

每10μL细胞裂解试剂可裂解1～1000个待测细胞，优选地裂解1～100个待测细胞，更有选地裂解1～20个待测细胞。

所述待测细胞为动物细胞；优选地，所述待测细胞为人的各种细胞。

利用细胞裂解产物进行全基因组扩增的方法，包括：利用上述细胞裂解试剂或上述细胞裂解方法获得的细胞裂解产物，直接或经运输后或经储存后，进行全基因组扩增。

优选的，运输条件包括常温/干冰运输至多10天，储存条件包括室温储存至多10天，或-20℃储存至多12个月，或-80℃储存。