[发明专利]一种低值鱼抗氧化肽的分离纯化方法

权利要求书

1.一种低值鱼抗氧化肽的分离纯化方法，其特征在于： 低值鱼为鲐鱼时，经分离获得高活性高纯度的低值鱼活性肽的氨基酸序列为：七肽LDIQKEV或八肽TAAIVNTA；

分离方法为：

1）以鲐鱼作为原材料经绞碎，加入去离子水置于恒温水浴43.72℃中经搅拌保温5min，再调节pH值到7.26；而后加入中性蛋白酶1203 U/g进行酶解反应4.53 h后，将酶解液置于100℃沸水中灭活10min，然后4℃下18000×g离心10min，收集上清液，即低值鱼活性肽酶解液 MPH；

2）将经蛋白酶解的低值鱼酶解液，经3500 Da和10000 Da的分子量超滤膜进行超滤，得到不同截留分子量的酶解液，对获得的酶液进行抗氧化活性的测定，将抗氧化活性最高的组分经凝胶色谱层析柱SephadexG-25分离，以双蒸水作为洗脱液，流速为0.5 mL/min，收集各洗脱峰，并经紫外检测器检测220 nm处样品的出峰，再经抗氧化活性检测，确定抗氧化活性最高的洗脱峰，待用；

3）将上述层析处理后抗氧化活性最高的洗脱峰经高效液相色谱层析柱XBridge^®peptide BEH C18分离纯化，以5 %－20 %乙腈进行梯度洗脱，流速为5 mL/min，收集洗脱峰，并经紫外检测器检测220 nm处样品出峰，再经抗氧化活性的检测，获得抗氧化活性最高组分即为低值鱼抗氧化肽。

2.一种高抗氧化活性的低值鱼活性肽，其特征在于：鲐鱼高抗氧化性活性肽为LDIQKEV或TAAIVNTA。