[发明专利]一种同时检测三种曲霉的引物探针组合和荧光定量PCR试剂盒

权利要求书

1.一种基于荧光PCR法同时检测三种曲霉的引物探针组合，所述曲霉包括烟曲霉、黄曲霉和黑曲霉，其特征在于，所述引物包括上游引物和下游引物，所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述下游引物的序列如SEQ ID NO.2所示，所述探针为在SEQ ID NO.3所示序列的5’端修饰有荧光基团、3’端修饰有荧光猝灭基团的物质。

2.根据权利要求1所述的引物探针组合，其特征在于，所述荧光基团包括FAM、SYBRGreenI、JOE、VIC、NED、CY-3、TEXASRed或CY-5。

3.根据权利要求1所述的引物探针组合，其特征在于，所述荧光猝灭基团包括TAMRA或BHQ1。

4.一种同时检测三种曲霉的检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：权利要求1～3任意一项所述引物探针组合、阴性对照、阳性对照和PCR反应液。

5.根据权利要求4所述的检测试剂盒，其特征在于，所述PCR反应液包括：dATP、dCTP、dGTP、dUTP、TaqDNA聚合酶、尿嘧啶-N-糖基化酶、参比荧光、MgCl₂和缓冲液。

6.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述阴性对照为含无关基因的质粒，所述无关基因的序列如SEQ ID NO.4所示。

7.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述阳性对照包括含烟曲霉阳性对照DNA片段的质粒、含黄曲霉阳性对照DNA片段的质粒和含黑曲霉阳性对照DNA片段的质粒，所述烟曲霉阳性对照DNA片段、黄曲霉阳性对照DNA片段和黑曲霉阳性对照DNA片段的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.5～7所示。