[发明专利]一种3D生物打印成型方法

权利要求书

1.一种3D生物打印成型方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)3D生物打印：利用3D打印机将3D打印生物墨水按照建好的数字模型，由10-50℃的墨水注射筒经针头打印到0-10℃的接收平台上；打印后，在0-10℃环境下储存5-120分钟进行加固定型，得到定型的凝胶材料；

(2)交联：定型的凝胶材料进行水洗；然后加入交联剂，于0-10℃的条件下交联反应0.5-48h；最后再进行水洗，洗去残余交联剂；

所述3D打印生物墨水为以猪、牛或羊真皮组织源性细胞外基质纳米纤维微粉为主要原料；所述交联剂包括戊二醛、京尼平或碳酸二亚胺；所述交联剂的用量为3D打印生物墨水质量的0.1-0.5％；

所述3D打印生物墨水，包括如下质量百分含量的原料制成：

胞外囊泡混悬液10-30％；

猪、牛或羊真皮软组织源性细胞外基质纳米纤维微粉5-15％；

促溶剂0.1-1％；

余量水。

2.如权利要求1所述的3D生物打印成型方法，所述胞外囊泡混悬液是从异体/自体/异种来源的细胞、体液中提取得到的胞外囊泡悬浮于PBS缓冲液中制得。

3.如权利要求1所述的3D生物打印成型方法，所述3D打印生物墨水的制备方法，包括如下步骤：

将猪、牛或羊真皮组织源性细胞外基质纳米纤维微粉、促溶剂与水混合，搅拌至溶解完全，然后调节pH为6-7.45，加入胞外囊泡混悬液，混合均匀，进行离心，得到3D打印生物墨水。

4.如权利要求1所述的3D生物打印成型方法，所述猪、牛或羊真皮软组织源性细胞外基质纳米纤维微粉的平均粒径低于30μm。

5.如权利要求1中所述的3D生物打印成型方法，所述水选自蒸馏水和/或超纯水，所述促溶剂包括盐酸、磷酸或醋酸。

6.权利要求1-5任一项所述的3D生物打印成型方法制备得到的产品。