[发明专利]一种制备人胆囊癌吉西他滨耐药细胞系的方法有效
| 申请号： | 201810088795.4 | 申请日： | 2018-01-30 |
| 公开（公告）号： | CN108315303B | 公开（公告）日： | 2021-03-30 |
| 发明（设计）人： | 锁涛;刘厚宝;王刚 | 申请（专利权）人： | 复旦大学附属中山医院;麦递途医疗科技（上海）有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/09 | 分类号： | C12N5/09 |
| 代理公司： | 上海容慧专利代理事务所(普通合伙) 31287 | 代理人： | 于晓菁 |
| 地址： | 200032 *** | 国省代码： | 上海;31 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 制备 胆囊 癌吉西 耐药 细胞系 方法 | ||
1.一种制备人胆囊癌吉西他滨耐药细胞系的方法，其特征在于包括如下步骤：
取对数生长期的人胆囊癌细胞接种在含体积百分比浓度为20％新生胎牛血清的DMEM培养液中，所述的人胆囊癌细胞为GBC-SD或者SGC-996细胞，置于37℃、含有CO2体积百分比浓度为5％的饱和湿度培养箱中培养，在上述含体积百分比浓度为20％新生胎牛血清的DMEM培养液中加入吉西他滨进行诱导，吉西他滨的初始浓度为0.2μmol/L，待细胞恢复正常生长时，以0.1μmol/L浓度递增，当细胞能在含吉西他滨浓度为0.5μmol/L、含体积百分比浓度为20％新生胎牛血清的DMEM培养液下正常生长、传代时，用含吉西他滨浓度为1.0μmol/L、含体积百分比浓度为20％新生胎牛血清的DMEM培养液冲击培养12h，然后更换含吉西他滨浓度为0.5μmol/L、含体积百分比浓度为20％新生胎牛血清的DMEM培养液培养5～10天，待细胞稳定生长、传代时，再次用含1.0μmol/L吉西他滨、含体积百分比浓度为20％新生胎牛血清的DMEM培养液冲击培养12h，直至细胞能在含有1.0μmol/L吉西他滨、含体积百分比浓度为20％新生胎牛血清的DMEM培养液中生长，然后以1.0μmol/L的浓度递增，当细胞能在含有4.0μmol/L吉西他滨、含体积百分比浓度为20％新生胎牛血清的DMEM培养液中正常生长、传代时，用含有10.0μmol/L的吉西他滨、含体积百分比浓度为20％新生胎牛血清的DMEM培养液冲击诱导12h，再更换含有吉西他滨浓度为4.0μmol/L、含体积百分比浓度为20％新生胎牛血清的DMEM培养液培养5～10天，待细胞稳定生长、传代时，再次用含1.0μmol/L吉西他滨、含体积百分比浓度为20％新生胎牛血清的DMEM培养液冲击培养12h，直至细胞能在含有10.0μmol/L吉西他滨、含体积百分比浓度为20％新生胎牛血清的DMEM培养液中生长，获得了能够在含有10μmol/L吉西他滨、含体积百分比浓度为20％新生胎牛血清的DMEM培养液中稳定生长、传代的人胆囊癌吉西他滨耐药细胞系。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于复旦大学附属中山医院;麦递途医疗科技（上海）有限公司，未经复旦大学附属中山医院;麦递途医疗科技（上海）有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201810088795.4/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
