[发明专利]一种连翘抗炎抗氧化成分的提取方法

说明书

本发明属于中药制药技术领域，提供一种连翘抗炎抗氧化成分的提取方法，基于DES制得提取溶剂，提取液中含有连翘主要成分，经实验表明提取溶剂对细胞无毒，连翘提取液具有抗炎抗氧化的作用。该提取溶剂可应用于连翘口服制剂制备。采用多元醇与胆碱类季铵盐按摩尔比4‑1:1混合，90℃加热反应获得的DES液体，将DES液体稀释作为提取溶剂提取连翘果实粉末抗炎抗氧化成分。连翘提取液无细胞毒性且具有良好的抗炎抗氧化作用。本发明使用了新型溶剂提取传统中药，优化了提取工艺，并在细胞层面评价了提取液的生物活性。对连翘口服液体制剂的开发和应用有重要意义。

技术领域

本发明属于中药制药技术领域，具体涉及一种连翘抗炎抗氧化成分的提取方法。

背景技术

连翘（Forsythia suspensa (Thunb.) Vahl），落叶灌木，木犀科连翘属植物。根据2015版《中华人民共和国药典》记载，连翘具有清热解毒，消肿散结，疏散风热等功效，用于治疗风热感冒，温病初起等。

目前，低共熔溶剂（DES）作为提取溶剂的相关研究已有多篇文献报道。Kristina等使用DES提取葡萄皮中的三种主要成分且成功提高了提取率；Chen等使用DES提取丹参中的五种主要成分且成功提高了提取率；Cvjetko等证明了DES的细胞毒性较低。由此可知，DES作为提取溶剂具有广阔的应用前景，可将其作为一种潜在的口服液体制剂使用，在连翘口服液体制剂的开发中具有实用价值。

申请号为201310052192.6，发明名称为从连翘叶中复合提取连翘苷、连翘酯苷A和芦丁的方法，该专利公开了一种从连翘叶中复合提取连翘苷、连翘酯苷A和芦丁的方法，其是利用连翘叶中的连翘苷为非极性化合物，易溶于甲醇、乙醇等有机溶剂，难溶于水，连翘酯苷A为极性化合物，易溶于水、甲醇、乙醇等，芦丁易溶于甲醇、热乙醇，不易溶于水的特性，综合考虑，通过乙醇浸提、大孔吸附树脂分离、反相硅胶柱层析连续提取工艺，从连翘叶中复合提取连翘苷、连翘酯苷A和芦丁，能把连翘叶的有效活性成分提取完全，合理利用了连翘叶资源；同时，本发明使用大孔吸附树脂的吸附和解吸附，可分离连翘苷、连翘酯苷A和芦丁，用反相硅胶纯化连翘酯苷A，分离完全，而且纯度较高，工艺条件简单，适合工业化生产。但是该方法采用的甲醇、乙醇对于细胞具有毒副作用，因此采用该方法并不能直接用于连翘口服制剂的制备。

发明内容

本发明目的在于提供一种连翘抗炎抗氧化成分的提取方法，基于DES制得提取溶剂，提取液中含有连翘主要成分，经实验表明提取溶剂对细胞无毒，连翘提取液具有抗炎抗氧化的作用。该提取溶剂可应用于连翘口服制剂制备。

本发明由如下技术方案实现的：一种连翘抗炎抗氧化成分的提取方法，采用多元醇与胆碱类季铵盐按摩尔比4—1：1混合，90℃加热反应获得的DES液体，将DES液体稀释作为提取溶剂提取连翘果实粉末抗炎抗氧化成分。

所述多元醇为乙二醇，1,2-丙二醇，丙三醇、1,4-丁二醇中的任意一种，所述胆碱类季铵盐为氯化胆碱。多元醇优选1,2-丙二醇，多元醇与胆碱类季铵盐的摩尔比优选3:1。90℃加热搅拌得到透明DES液体，将DES液体与水按体积比为2.4—4:1混合均匀即为提取溶剂。用提取溶剂提取连翘的具体方法为：连翘果实粉末与提取溶剂按照0.5g : 15 mL的比例混合，然后微波辅助提取，微波功率800—1000 W，提取温度为85—95 ℃，提取4.5—5.5min，过滤滤液即为连翘提取液。

采用本发明所述方法获得的提取溶剂使用MTT法进行细胞毒性的检测，结果表明提取溶剂对细胞存活率没有影响，可证明提取溶剂对细胞没有毒性；DES在室温下为液体溶剂，几乎没有蒸汽压，具有良好的热稳定性和化学稳定性，可作为药物载体。此外，由于DES生产成本较低，且大多数在使用剂量内无毒副作用，原料来源广泛，可应用于医药领域。

对所获得的连翘提取液进行抗炎抗氧化等生物活性评估，结果证明连翘提取液具有良好的抗炎抗氧化的作用，并具有剂量依赖性。