[发明专利]联合使用口服肿瘤疫苗和免疫抑制阻滞剂的癌症治疗

说明书

本发明的课题在于提供在癌症免疫治疗中有效的联合疗法；本发明提供的抗肿瘤剂包含转化双歧杆菌，并与免疫抑制阻滞剂联合使用；该转化双歧杆菌被设计为：包含编码WT1蛋白质的DNA和编码源自双歧杆菌的GNB/LNB基质结合膜蛋白质的DNA，并将作为抗原的WT1蛋白质呈递于双歧杆菌表层上；该转化双歧杆菌能够作为口服肿瘤疫苗使用。

技术领域

本发明涉及一种抗肿瘤剂，其特征在于，包含能够表达或呈递作为抗原的WT1蛋白质的转化双歧杆菌，并联合使用免疫抑制阻滞剂。

本申请请求通过参考援引于此的日本申请特愿2016-250560号作为优先权。

背景技术

WT1(Wilms tumor 1)基因是作为儿童肾肿瘤、即肾母细胞(Wilms)肿瘤的致病基因之一而分离出的基因。在肾母细胞肿瘤中，存在该基因的缺失或突变，在源自肾母细胞肿瘤的细胞株中导入正常的WT1基因时，细胞增殖被抑制，从而认为WT1基因是抑癌基因。但是，通过之后的研究发现，WT1蛋白质在白血病或各种固体癌中的表达量很高，与其说WT1基因是抑癌基因，不如说其发挥了致癌基因的功能(非专利文献1：Jpn J Clin Oncol 2010；40：377-387)。有报告称在固体癌、例如前列腺癌中，在临床上约50％的肿瘤表达WT1基因(非专利文献2：Modern Pathology 2006；19：804-814)。

癌症的免疫疗法始于1980年代通过自然免疫进行的LAK疗法，目前进行NK细胞疗法等自然免疫疗法和利用获得性免疫的治疗，其中，利用获得性免疫的治疗有：将构成癌抗原的蛋白质的片段的肽作为靶的肽疗法、使树状细胞识别癌肽并导回体内的树状细胞疫苗疗法等。

发现在利用WT1肽对小鼠进行免疫、或者利用WT1肽对于从人的外周血单个核细胞分化出的树状细胞进行刺激时，WT1肽可以作为能够诱导WT1特异性细胞毒性T细胞(CTL)的树状细胞疫苗进行使用。另外，也使用WT1肽进行了临床试验。由于现有的WT1肽以适于某一特定的人白细胞抗原(HLA)的方式进行制备，因而需要通过DNA分型来确认患者的HLA等位基因(专利文献1：日本专利特许第5714619号公报)。通过之后的研究，尝试使用将WT1蛋白质的全部序列覆盖的全序列型疫苗治疗癌症。该疫苗也可适用于各种HLA类型的患者。该疫苗也将癌抗原特异性的杀伤性T细胞和促进免疫反应的辅助性T细胞激活。

作为WT1疫苗的给药途径，最常见的有皮下注射或皮内注射，除此之外，还尝试通过各种给药途径、例如经皮给药、颊给药、经鼻给药、舌下给药等黏膜给药进行免疫诱导。但是，目前尚未有关于口服给药的报告。

细胞的细胞膜是将细胞内外分离的生物膜，细胞膜表面上存在大量具有提供细胞信息的功能和输送细胞内外物质的功能的膜蛋白质。提出了使特定的抗原与膜蛋白融合并呈递于微生物的细胞表层，作为人为诱导抗原抗体反应的口服疫苗进行使用这一概念。例如，存在使用具有对聚-γ-谷氨酸合成酶等酶蛋白的膜结合部进行编码的基因的载体，呈递于宿主微生物的细胞表层的例子(专利文献2：日本专利特表2005-500054号公报)。另外，关于将源自引起传染病的细菌的鞭毛蛋白质作为疫苗使用的技术，存在关于作为胶囊内容物而含有表达鞭毛蛋白的转化微生物的口服疫苗的报告(专利文献3：日本专利特许5187642号公报)。在此，有报告称作为生成鞭毛蛋白的细菌而使用属于双歧杆菌(Bifidobacterium)属的微生物(将其总称为“双歧杆菌”)、或者乳酸菌等所有被称为有益菌的肠内细菌来制备转化微生物。