[发明专利]用于高空间分辨率地确定样品中的分离的、以激励光可激励以发射发光的分子的位置的方法

权利要求书

1.一种用于高空间分辨率地确定在样品(6)中在一个或多个空间方向上分离的分子(24)的位置的方法，其中，所述分子(24)能够以激励光(3)激励以发射发光(12)，

其中，使所述激励光(3)以以下强度分布(19)对准所述样品(6)：所述强度分布具有零点(20)和强度上升区域(22)，所述强度上升区域在所述空间方向中的每个空间方向上在两侧邻接所述零点(20)，

其中，对于在所述样品(6)中所述零点(20)的不同位置中的每个位置，记录由所述分子(24)发射的发光(12)，

其中，由对于所述零点(20)的不同位置记录的发光(12)的强度推导出所述样品(6)中的所述分子(24)的位置；

其特征在于，所述零点(20)布置在所述样品(6)中的不超过n×3个不同位置处，以便由所述发光(12)的对于所述零点(20)的不同位置记录的强度推导出在所述n个空间方向上所述分子(24)的位置，其中，n是以下空间方向的数量：在所述空间方向上确定所述样品中所述分子(24)的位置，其中，所述不同位置——在所述样品(6)中所述零点(20)布置在所述不同位置处——在每个空间方向上在所述样品中的限界的位置区域(23)的中心的两侧上包括各一个位置，其中，在所述每个空间方向上确定所述样品(6)中的所述分子(24)的位置，所述分子(24)布置在所述限界的位置区域中。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，将所述零点(20)布置在所述样品中的不超过(n×2)+1个不同位置处，以便由所述发光(12)的对于所述零点(20)的不同位置记录的强度推导出在所述n个空间方向上所述分子(24)的位置。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，将所述零点(20)布置在所述样品中的不超过n+2个不同位置处，以便由所述发光(12)的对于所述零点(20)的不同位置记录的强度推导出在所述n个空间方向上所述分子(24)的位置。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，除了所述限界的位置区域(23)的中心的两侧上的两个位置以外，所述不同位置——在所述样品(6)中所述零点(20)布置在所述不同位置处——在每个空间方向上包括在所述限界的位置区域(23)的中心上的一个位置(D)，其中，在所述每个空间方向上确定所述样品(6)中的所述分子的位置。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其特征在于，当在两个空间方向上确定所述分子(24)的位置时，所述不同位置——在所述样品(6)中在所述不同位置处布置所述零点(20)——是一个中心位置(D)和三个外围位置，其中，所述外围位置在由所述两个空间方向展开的并且延伸通过所述中心位置的平面中等间距地布置在围绕所述中心位置的圆弧(25)上。

6.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其特征在于，当在三个空间方向上确定所述分子(24)的位置时，所述不同位置——在所述样品(6)中在所述不同位置处布置所述零点(20)——是一个中心位置和四个外围位置，其中，所述外围位置等间距地布置在围绕所述中心位置的球壳体上。

7.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其特征在于，如此调节所述激励光(3)的最大强度，使得所述零点(20)的每个位置至所述样品(6)中的所述零点(20)的所述位置之间的每个点的最大间距(a)不大于每个强度上升区域(22)在所述最大间距(a)的方向上的延展，在所述延展上所述激励光(3)的强度上升至所述激励光(3)的饱和强度(I_S)的90％。

8.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其特征在于，邻接所述零点(20)的所述强度上升区域(22)绕着所述零点(20)旋转对称地构造。

9.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其特征在于，所述激励光(3)在所述激励光的波长和/或偏振的方面和/或邻接所述零点(20)的强度上升区域(22)在所述激励光(3)的强度在不同空间方向上的变化过程方面根据所述零点(20)的相应位置不同地构造。