[发明专利]接头分子及其在纯化肽的方法中的用途

说明书

当前发明涉及一种用于纯化通过固相肽合成(SPPS)制得的肽的方法，并且涉及用在该方法中的对应的接头分子。

技术领域

当前发明涉及一种用于纯化通过固相肽合成(SPPS)制得的肽的方法，并且涉及用在该方法中的对应的接头分子。

背景技术

固相肽合成是一种已知的用于制备肽的方法。除了肽的合成，其纯化也是一个至关重要的方法步骤。

广泛使用的用于纯化肽的方法是制备型高效液相色谱(HPLC)。该方法的缺点是在期望的生产量方面的可扩展性差，因此不能使用同一设备来生产不同的量；这导致对应的复杂设施的相对高的购置成本。另一缺点在于，对单个级分的正确分析评估需要相对广泛的知识；还要补充的是，在操作过程中溶剂和色谱柱材料(固相)的消耗。

因此，为了降低肽制备的成本，成本更加低廉且更不易受干扰的方法是有利的。

EP 0 552 368 A1描述了一种用于纯化肽的方法，其中所谓的接头一方面与合成的全长肽的N端末端共价键合，另一方面通过硫醇基与官能化的硅藻土反应共价键合至硫醚。全长肽由此被固定化并且可以被纯化。随后，在碱性条件下释放全长肽。然而，该方法不适合于含硫醇的肽，例如含有氨基酸半胱氨酸或青霉胺的肽。另外，存在的缺点是，用于纯化的固相(在这种情况下是硅藻土)不是预设用于再利用的或不适合于再利用。

EP 2 501 711 B1提出了一种类似的方法，其中接头一方面通过合成的全长肽的N端末端，另一方面通过叠氮化物(-N₃)和炔烃之间的1,3-偶极环加成(Huisgen反应)，与固相(合成的亲水聚合物，诸如PEGA)结合。该方法的缺点是，在此必须加入铜或含铜化合物，以进行1,3-偶极环加成反应。许多肽络合铜，特别是具有硫的那些，即含有甲硫氨酸和/或半胱氨酸的那些；精氨酸和赖氨酸同样可以结合铜。因此，难以再次移除铜，并且由于剩余铜的毒性，该方法并不能应用至所有情况，特别地不适用于肽治疗剂的纯化。而且，在此也有这个缺点，即用于纯化的固相不是预设用于再利用的或不适合于再利用。

发明内容

因此，本发明的目的在于，提供一种用于纯化肽的方法，该方法不需要完整的HPLC设备，也适合于含硫或结合铜的肽。此外，本发明的目的在于，提供一种适合于纯化肽的方法，该方法使得用于纯化的固相的再生和再利用成为可能。另外，本发明的目的在于，提供一种化合物，其使得全长肽的N端氨基和固相之间的连接成为可能。

在当前发明的第一方面中，该目的通过一种具有通式

X₁-L-X₂ (1)的化合物得以实现，其中

X₁选自

-其中每个R¹和R²都彼此独立地选自H或B，其中至少R¹或R²是B，其中

-R³选自H或B，

-其中B是对酸不稳定的氨基保护基团，其中

-R⁴选自H、C₁-C₁₂-烷基或芳基，其中醛基或酮基可以由对酸不稳定的保护基团保护，

L选自在碱性条件下可从X₂上亲核裂解的官能接头化合物，特别地L 具有-T-U-的形式，其中