[发明专利]一种制备抗癌胚抗原的纳米抗体的方法有效
| 申请号: | 201711469625.2 | 申请日: | 2017-12-29 |
| 公开(公告)号: | CN108103068B | 公开(公告)日: | 2021-05-04 |
| 发明(设计)人: | 宋海鹏 | 申请(专利权)人: | 深圳市国创纳米抗体技术有限公司 |
| 主分类号: | C12N15/13 | 分类号: | C12N15/13;C12N15/81;C12N1/19;C07K16/30;C12R1/645 |
| 代理公司: | 北京市众天律师事务所 11478 | 代理人: | 李新军 |
| 地址: | 518057 广东省深圳市南山区粤*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 制备 抗癌 抗原 纳米 抗体 方法 | ||
1.一种制备抗癌胚抗原的纳米抗体的方法,所述方法包括以下步骤:
(1)扩增抗癌胚抗原纳米抗体的序列如SEQ ID NO.1所述的编码基因;
(2)将步骤(1)获得的编码基因连接于表达载体pKLAC2;
(3)将步骤(2)获得的载体转导入宿主细胞乳酸克鲁维酵母中;
(4)诱导步骤(3)获得的宿主细胞,收获表达的抗癌胚抗原的纳米抗体。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(2)所述的连接为在表达载体pKLAC2的第304碱基起始的NotI位点和第329位点起始的EcoRI位点之间插入编码基因。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,步骤(3)所述的宿主细胞为乳酸克鲁维酵母GG799。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤(4)所述的诱导为在培养的温度为30℃,pH值为7.2,培养基碳源为乳糖的生长条件下,培养24小时后以半乳糖诱导表达抗癌胚抗原的纳米抗体,72小时后收获表达的抗体。
5.一种含有抗癌胚抗原纳米抗体的表达载体,所述抗癌胚抗原纳米抗体的编码基因如SEQ ID NO.1所述。
6.根据权利要求5所述的表达载体,其特征在于,所述表达载体为pKLAC2。
7.根据权利要求6所述的表达载体,其特征在于,所述编码基因在表达载体pKLAC2的第304碱基起始的NotI位点和第329位点起始的EcoRI位点之间插入并与所述表达载体连接。
8.一种含有权利要求5-7任一所述表达载体的宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞为乳酸克鲁维酵母。
9.根据权利要求8所述的宿主细胞,其特征在于,所述乳酸克鲁维酵母为GG799株。
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