[发明专利]一种基于核酸适配体肺转移性骨肉瘤组织免疫荧光试剂盒有效
申请号: | 201711454761.4 | 申请日: | 2017-12-28 |
公开(公告)号: | CN108169488B | 公开(公告)日: | 2019-05-10 |
发明(设计)人: | 李娟;王丽萍;李佩佩;陈杰;杨黄浩 | 申请(专利权)人: | 福州大学 |
主分类号: | C12N15/115 | 分类号: | C12N15/115;G01N33/574 |
代理公司: | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人: | 蔡学俊 |
地址: | 350108 福建省福州市*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 肺转移 骨肉瘤 核酸适配体 荧光试剂 组织免疫 免疫荧光染色 骨肉瘤细胞 抗原修复液 特异性结合 低温保存 定位性能 设备要求 石蜡包埋 石蜡切片 特异性强 现实意义 新型分子 荧光探针 早期诊断 种特异性 封闭液 清洗液 试剂盒 稀释液 探针 病理 细胞 诊断 治疗 检查 研究 | ||
1.一种基于核酸适配体肺转移性骨肉瘤组织免疫荧光试剂盒,其特征在于:所述核酸适配体的序列为ATC CAG AGT GAC GCA GCA GGT TGA AAT GAT TAA TCC GCA ATA TTT TATTGG ACA CGG TGG CTT AGT。
2.根据权利要求1所述的一种基于核酸适配体肺转移性骨肉瘤组织免疫荧光试剂盒,其特征是:试剂盒还包括a)抗原修复液,b)清洗液,c)核酸适配体稀释液,d)封闭液,采用修饰了Cy5的核酸适配体作为荧光探针,标记石蜡包埋的骨肉瘤组织;
所述的抗原修复液为0.005 -0.02M、pH 5.0-7.0柠檬酸钠缓冲液;
所述的清洗液为0.0057-0.0077M、pH 7.2-7.6 PBS缓冲液;
所述的核酸适配体稀释液为200-300nM Cy5标记的核酸适配体;
所述的封闭液含有3-5mL binding buffer和10-30% FBS和0.05-0.2mg/mL的鲑鱼精DNA,
其中binding buffer含有0.05-0.2mg/mL tRNA,0.5-2mg/mL BSA,4-6mM MgCl2, 3.5-5.5mg/mL葡萄糖,溶剂为0.0057-0.0077M、pH 7.2-7.6 PBS缓冲液。
3.根据权利要求2所述的一种基于核酸适配体肺转移性骨肉瘤组织免疫荧光试剂盒,其特征是:所述的抗原修复液含0.01M 、pH 6.0柠檬酸钠缓冲液。
4.根据权利要求2所述的一种基于核酸适配体肺转移性骨肉瘤组织免疫荧光试剂盒,其特征是:所述的清洗液为0.0067M、pH 7.4 PBS缓冲液。
5.根据权利要求2所述的一种基于核酸适配体肺转移性骨肉瘤组织免疫荧光试剂盒,其特征是:所述的核酸适配体稀释液为250nM Cy5标记的核酸适配体。
6.根据权利要求2所述的一种基于核酸适配体肺转移性骨肉瘤组织免疫荧光试剂盒,其特征是:所述的封闭液含有4ml binding buffer,20%FBS和0.1mg/mL的鲑鱼精DNA;其中所述的binding buffer含0.1mg/mL tRNA ,1mg/mL BSA,5mM MgCl2,4.5mg/mL葡萄糖,0.0067M、pH 7.4 PBS缓冲液。
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