[发明专利]一种体外蛋白合成体系、试剂盒及其制备方法在审
| 申请号: | 201711452033.X | 申请日: | 2017-12-28 |
| 公开(公告)号: | CN109971783A | 公开(公告)日: | 2019-07-05 |
| 发明(设计)人: | 郭敏;徐开;陈鉴冰;周子鉴;柴智;章小铃;王海鹏;于雪 | 申请(专利权)人: | 康码(上海)生物科技有限公司 |
| 主分类号: | C12N15/81 | 分类号: | C12N15/81;C12N15/85 |
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| 地址: | 201321 上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 蛋白合成 试剂盒 种体 制备 反应促进剂 细胞提取物 合成体系 体外蛋白 外源蛋白 无细胞 合成 | ||
1.一种体外蛋白合成体系,其特征在于,包括:
(a) 细胞或细胞提取物、或其组合;
(b) 第一反应促进剂,所述第一反应促进剂选自下组:铝、铝盐、氧铝复合物、或其组合。
2.如权利要求1所述的蛋白合成体系,其特征在于,所述细胞选自下组:大肠杆菌、细菌、哺乳动物细胞(如HF9、Hela、CHO、HEK293)、植物细胞、酵母细胞、或其组合。
3.一种体外的无细胞的蛋白合成体系,其特征在于,包括:
(a) 细胞提取物;和
(b) 第一反应促进剂,所述第一反应促进剂选自下组:铝、铝盐、氧铝复合物、或其组合。
4.如权利要求1或3所述的蛋白合成体系,其特征在于,所述氧铝复合物包括氧铝纳米颗粒。
5.如权利要求1或3所述的蛋白合成体系,其特征在于,所述氧铝复合物包括Al2O3。
6.如权利要求1或3所述的蛋白合成体系,其特征在于,所述氧铝复合物的粒径为0.5-20 mm,较佳地,0.8-10 mm,更佳地,1-5 mm。
7.如权利要求1或3所述的蛋白合成体系,其特征在于,所述氧铝复合物的平均重量为1-80 mg,较佳地,3-50 mg,更佳地,4-30 mg。
8.如权利要求1或3所述的蛋白合成体系,其特征在于,所述第一反应促进剂中,所述氧铝复合物的含量(wt%)为0.1-20%,较佳地, 1-10%,更佳地,2%-8%,更佳地,4%-7%,更佳地,5.5%-6.5%,以所述第一反应促进剂的总重量计。
9.如权利要求1或3所述的蛋白合成体系,其特征在于,所述蛋白合成体系中,所述第一反应促进剂的含量(wt%)为20%-70%,较佳地,30%-60%,更佳地,45%-55%,以蛋白合成体系的总重量计。
10.一种权利要求1或权利要求3所述的蛋白合成体系的生产方法,其特征在于,包括步骤:
将组分(i)和组分(ii)混合,从而获得权利要求1或权利要求3所述的蛋白合成体系,其中,所述组分(i)选自下组:细胞或细胞提取物、或其组合;所述组分(ii)为第一反应促进剂,所述第一反应促进剂选自下组:铝、铝盐、氧铝复合物、或其组合。
11.如权利要求10所述的生产方法,其特征在于,所述蛋白合成体系中,组分(i)与组分(ii)的质量比为0.1-10:0.1-10,较佳地,0.5-8:0.5-8,更佳地,0.8-5:0.8-5,更佳地,0.9-2:0.9-2。
12.一种体外蛋白合成的方法,其特征在于,包括:
(i) 提供权利要求1或权利要求3所述的蛋白合成体系,并加入外源的用于指导蛋白质合成的DNA分子;
(ii) 在适合的条件下,孵育步骤(i)的蛋白合成体系一段时间T1,从而合成由所述外源DNA编码的蛋白质。
13.如权利要求12所述的方法,其特征在于,所述的方法还包括:(iii) 任选地从所述蛋白合成体系中,分离或检测所述的由外源DNA编码的蛋白质。
14.一种试剂盒,其特征在于,包括:
(k1) 第一容器,以及位于第一容器内的组分(i),所述组分(i)选自下组:细胞或细胞提取物、或其组合;
(k2) 第二容器,以及位于第二容器内的组分(ii),所述组分(ii)为第一反应促进剂,所述第一反应促进剂选自下组:铝、铝盐、氧铝复合物、或其组合;和
(kt) 标签或说明书。
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